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高效液相色譜儀的柱子選擇與使用方法

來源:天津市蘭博實驗儀器設備有限公司   2025年04月20日 11:21  
   一、色譜柱的選擇要點
  高效液相色譜儀是分離系統的核心部件,其選擇直接影響分析結果的準確性和重現性。選擇色譜柱時需考慮以下幾個關鍵因素:
  ??固定相類型??:根據分析物性質選擇C18、C8、苯基柱或氨基柱等。C18柱適用于大多數非極性至中等極性化合物,而極性化合物可能需要氨基柱或氰基柱。
  ??pH耐受范圍??:硅膠基質柱的耐受超出此范圍需選擇雜化或聚合物基質柱。
 
  二、色譜柱的正確使用方法
  1、??柱前處理??:
  新柱使用前應按說明書進行活化,通常用高比例有機相沖洗去除保存溶劑。梯度洗脫方法應從低有機相開始逐步提高。
 
  ??2、流動相匹配??:
  確保流動相與柱保存溶劑互溶,避免直接從不互溶溶劑轉換。水相緩沖液應現配現用,防止微生物生長或鹽析出。
 
  3、??樣品前處理??:
  樣品應溶解在初始流動相或弱溶劑中,避免使用強溶劑造成峰形畸變。復雜樣品需經過濾或固相萃取處理。
 
  4、??柱保護措施??:
  在柱前安裝保護柱可延長分析柱壽命。對于生物樣品或復雜基質,建議使用在線過濾器。
 高效液相色譜儀
  三、維護與保存
  ??1、日常沖洗??:
  每天使用后應用高比例有機相沖洗30分鐘以上,去除柱內殘留物。緩沖液使用后需先用水沖洗再轉有機相。
 
  ??2、長期保存??:
  不使用時,柱應保存在高比例有機相中,兩端密封防止干燥。硅膠柱避免保存在純水中。
 
  3、??性能監測??:
  定期用標準品測試柱效、不對稱因子和保留時間,建立柱性能檔案。當柱效下降或峰形明顯變差時應考慮更換。
 
  ??4、故障處理??:
  壓力異常升高可能因篩板堵塞,可嘗試反向沖洗或更換篩板。峰形拖尾可能因柱頭塌陷或污染,必要時進行柱頭修復或更換。
 
  正確選擇和使用色譜柱不僅能獲得理想分離效果,還能延長柱壽命,降低分析成本。實驗人員應根據具體應用需求,建立適合自己實驗室的標準操作規程。

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