光學顯微鏡的工作距離（WD）是一個重要的參數，它直接關系到顯微鏡的使用效果和觀察質量。以下是關于光學顯微鏡工作距離的詳細介紹：

定義

光學顯微鏡的工作距離，也被稱為物距，是指試樣調準焦點時，物鏡前緣與試樣表面（或當物鏡使用蓋玻片時，與蓋玻片頂面）的距離。簡單來說，就是物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。

影響因素

物鏡參數：工作距離的大小主要取決于物鏡的參數，特別是物鏡的數值孔徑（NA）和焦距。在物鏡數值孔徑一定的情況下，工作距離與孔徑角成反比，即工作距離短則孔徑角大。而數值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離通常較小。

放大倍數：一般來說，物鏡的放大倍數越高，其工作距離越短。例如，10倍物鏡的有效工作距離可能為6.5mm，而40倍物鏡的有效工作距離則可能縮短至0.48mm。

實際應用

選擇合適的工作距離：在使用光學顯微鏡時，需要根據具體的觀察對象和要求來選擇合適的物鏡和工作距離。對于需要長工作距離的觀察，可以選擇長工作距離的物鏡或倒置顯微鏡。

調整工作距離：鏡檢時，被檢物體應處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。為了獲得清晰的圖像，需要調整工作距離以使焦點準確落在被檢物體上。

成像質量：工作距離的選擇不僅影響觀察的清晰度，還可能影響成像的質量。過長或過短的工作距離都可能導致圖像模糊或失真。

注意事項

避免碰撞：在調整工作距離時，要注意避免物鏡與被檢物體發生碰撞，以免損壞物鏡或被檢物體。

精確調焦：為了確保觀察的清晰度和準確性，需要精確調整工作距離和焦距。

定期維護：光學顯微鏡作為精密儀器，需要定期進行維護和保養，包括清潔物鏡、調整光路等，以確保其工作正常和延長使用壽命。

綜上所述，光學顯微鏡的工作距離是一個重要的參數，它直接關系到顯微鏡的使用效果和觀察質量。在實際應用中，需要根據具體的觀察對象和要求來選擇合適的物鏡和工作距離，并注意調整和維護。