重組蛋白的表達系統是用于生產重組蛋白的生物技術平臺,每種系統都有其特定的優勢和局限性。以下是幾種主要的重組蛋白表達系統:
原核表達系統:
大腸桿菌(Escherichia coli):常用的原核表達系統,具有遺傳背景清晰、培養簡單、成本低廉等優點。但大腸桿菌不能進行復雜的翻譯后修飾。
枯草桿菌:具有蛋白分泌能力強、遺傳特性強等優勢,但重組表達質粒在枯草桿菌中穩定性較差。
真核表達系統:
酵母:如釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe),具有翻譯后加工能力,適合于表達真核蛋白。
昆蟲/桿狀病毒表達系統:能夠對真核蛋白進行翻譯后加工,適用于表達復雜蛋白,但存在表達周期長、成本高等缺點。
哺乳動物細胞表達系統:如CHO細胞、HEK293細胞等,能夠進行與人類相似的翻譯后修飾,適合表達需要復雜糖基化等修飾的蛋白。
其他真核表達系統:
絲狀真菌:如曲霉菌屬(Aspergillus),可用于生產某些特殊類型的重組蛋白。
植物細胞表達系統:利用植物的葉綠體或細胞質進行蛋白表達,適用于生產口服疫苗等。
分泌型表達系統:
某些表達系統允許目標蛋白分泌到培養基中,便于蛋白的純化和回收。
融合蛋白表達系統:
利用融合蛋白技術,將目標蛋白與某些具有溶解性或穩定性的蛋白質(如GST、MBP等)融合,以提高目標蛋白的可溶性和穩定性。
無細胞表達系統:
在無細胞體系中進行蛋白表達,可以快速生產蛋白,尤其適用于難以在細胞內表達的膜蛋白或毒素蛋白。
穩定細胞株表達系統:
通過基因工程手段將目標蛋白基因整合到宿主細胞的基因組中,形成穩定表達的細胞株,用于長期生產蛋白。
選擇哪種表達系統取決于所需蛋白的特性、表達量、所需的翻譯后修飾類型、成本和生產規模等因素。科研人員通常會根據目標蛋白的特性和實驗需求選擇最合適的表達系統。
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