夾心 ELISA 是一種常用于檢測和定量免疫測定中抗原的 ELISA。它是一種酶聯(lián)免疫吸附測定,使用兩種抗體:捕獲抗體和檢測抗體。在這種技術(shù)中,樣品中的抗原在抗體之間結(jié)合。ELISA的目的是檢測樣品中靶抗原的存在。因此,在夾心ELISA的情況下,靶抗原在捕獲抗體和檢測抗體之間結(jié)合。在程序開始時,捕獲抗體已經(jīng)固定在表面上。然而,檢測抗體是定量前的最后一步。夾心ELISA中的兩種抗體結(jié)合到靶抗原上的不同位置。此外,捕獲抗體和靶標(biāo)抗體不干擾彼此的結(jié)合能力非常重要。
夾心ELISA中的步驟包括用捕獲抗體涂覆表面,阻斷表面上未結(jié)合的蛋白質(zhì)結(jié)合側(cè),添加含有靶抗原的樣品,添加檢測抗體標(biāo)記的偶聯(lián)物和檢測。該技術(shù)的優(yōu)點是其高特異性和高靈敏度。然而,其主要缺點是捕獲和檢測抗體之間的相互作用。
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