細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下,使其生長繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個細(xì)胞,也可以是細(xì)胞群。細(xì)胞生存基本條件有環(huán)境、溫度、氣體環(huán)境和氫離子濃度、基本營養(yǎng)物質(zhì)、促生長因子、激素、滲透壓等因素。下面給大家講解細(xì)胞生存環(huán)境和代謝。
一、無污染環(huán)境
無菌、無毒是保證細(xì)胞生存的首要條件。保證細(xì)胞生存環(huán)境無任何污染、代謝物及時清除,是維持細(xì)胞生存的基本條件。
二、溫度:35~37℃
人哺乳動物:36.5℃±0.5℃;
鳥類:38.5℃;
培養(yǎng)細(xì)胞對低溫耐受力比高溫強(qiáng);溫度上升不超過39℃時,細(xì)胞代謝強(qiáng)度與溫度成正比。
39~40℃1小時,受損傷的細(xì)胞可能恢復(fù);
41~42℃1小時,嚴(yán)重?fù)p傷,個別細(xì)胞恢復(fù);
43℃以上1小時,細(xì)胞全部死亡;
溫度不低于0℃時,細(xì)胞代謝有影響,無傷害作用;
置于 25~35℃,細(xì)胞能生存,但生長速度減慢;
放在 4℃ 數(shù)小時;再放回 37℃ 細(xì)胞仍繼續(xù)生長。
細(xì)胞代謝隨溫度降低而緩慢,溫度降至冰點(diǎn)以下時,細(xì)胞因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。
在培養(yǎng)液中加一定量保護(hù)劑(二甲基亞砜或甘油),封入安瓿中后,凍于液氮中,- 196℃,能長期貯存,解凍后細(xì)胞復(fù)蘇,仍能繼續(xù)生長,細(xì)胞的生物性狀不受任何影響,此為細(xì)胞保存的主要手段。
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