為了保證人ELISA試劑盒實驗的穩定及順利完成,廣大科研者和經銷商首先要考慮的就是產品的選擇,一定要選用質量靠得住的產品。其實,我們在使用ELISA試劑盒時,對自身以及對產品的要求都是很嚴格的;下面就為大家提供幾點參考
1.抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELNSA,實際上有時候二者結合效果更好。例如。對于雙抗夾心法而言,用多抗進行捕挾而單抗進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法BISA中捕獲抗體與檢測抗體〈不論多抗還是單抗)的周對很有講究。我們不希望輔獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點,為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生了沖突,就會對實驗結果產生較大影響。要蔽免這一問題,我i們門可以選擇購買“matched pair”的捕獲/檢測則抗體對,這些打包在一起的抗體是商家經過驗證才推薦的好組合。
2.交叉反應
如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。盡管現在購買源自動物的抗體越來越容易,我們仍有必要確認一下是否會產生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行LISA檢狽時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗。而不能與捕獲抗體起反應·如果檢則用二抗與捕獲抗體結合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。
3.檢測方式
如今檢測BLISx有許多途徑,我們可以根據自己人EITSA式試就險的偏好進行選擇。—般ELISA檢則的是酶促足反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的癇(例伽如通常使用的辣根過氧化物酶JBP〉,而反應體系中添加有相應的底物《如3,3-二氨基聯苯胺DNB〉。這種酶促反應生成具有特征性的顏色。可以通過分光光度計進行檢測。堿性硝酌酶-R也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈雷親和素標記的醇與親和素標記的一抗結合。此外BLISk的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。
上海通蔚一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業單位提供科研試劑和完善的人ELISA試劑盒技術服務,滿足生物化學、分子生物學、細胞生物學、免疫學等生物科技實驗需求。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。