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酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體，此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應，并牢固地結合形成仍保持活性的免疫復合物。當加入相應底物時，底物被酶催化而呈現出相應反應顏色。顏色深淺與相應抗原或抗體含量成正比。
酶標儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長，而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片，只能截取特定波長進行檢測。
酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。
光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本。該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號。電信號經前置放大，對數放大，模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算，最后由顯示器和打印機顯示結果。
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