高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
如果高效液相色譜儀的檢測器是紫外檢測器,首先確保樣品具有紫外吸收。如果沒有紫外吸收,可以選擇熒光檢測器、蒸發檢測器等。總之,您需要樣品的主要成分在檢測器上有一個響應信號。
高效液相色譜儀測試前,應將樣品制備成一定濃度的溶液(制備溶液時,應根據樣品的溶解度選擇合適的溶劑。為了減少溶劑峰,通常使用流動相作為溶劑,樣品溶液的濃度通常制備為約10微克/毫升)。如果樣品溶解良好且沒有其他雜質,樣品溶液可直接吸入注射。如果樣品中有其他成分,例如,當測定口服藥物制劑中成分的含量時,口服藥物制劑中通常有其他輔料,樣品溶液在注射前應進行過濾(通常使用0.22um或0.45um針頭過濾器)
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