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這五步幫你了解固相萃取的操作流程

來(lái)源:上海泰特睿杰信息科技有限公司   2023年01月05日 14:31  
  固相萃取作為樣品前處理技術(shù),在實(shí)驗(yàn)室中得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。它利用分析物在不同介質(zhì)中被吸附的能力差將標(biāo)的物提純,有效的將標(biāo)的物于干擾組分分離,大大增強(qiáng)對(duì)分析物特別是痕量分析物的檢出能力,提高了被測(cè)樣品的回收率。
  固相萃取的基本程序一般可分為以下五個(gè)步驟,但在實(shí)際應(yīng)用中可根據(jù)分析手段對(duì)樣品的要求對(duì)這五個(gè)步驟進(jìn)行增加或減少。
  1.固相萃取柱的預(yù)處理活化:
  用適當(dāng)?shù)娜芤簩?duì)固相萃取柱進(jìn)行預(yù)處理活化,可以展開(kāi)碳?xì)滏湥黾雍湍繕?biāo)分析物作用的表面積,可以除去柱上吸附的對(duì)分析有影響的雜質(zhì),保證良好的萃取再現(xiàn)性,同時(shí)注意在上樣前預(yù)處理好的固相柱必須保持濕潤(rùn)。
  2. 固相萃取柱的上樣:
  將樣品加于固相萃取柱中,用正壓或負(fù)壓使樣品通過(guò)柱子,控制好樣品的流速,對(duì)于生物樣品,一般控制在1.5 ml/min。對(duì)于以離子交換為作用機(jī)理的萃取,樣品通過(guò)固相萃取柱的速度應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档停员WC分析物有足夠的時(shí)間與SPE柱填料的離子交換功能團(tuán)發(fā)生充分的作用。
  3.固相萃取柱的淋洗:
  用適當(dāng)?shù)那逑慈軇┻x擇性地洗掉附著力弱的雜質(zhì)而保留目標(biāo)分析物于固相萃取柱上。清洗溶劑的選擇取決于最后的分析手段。
  4. 固相萃取柱的干燥:
  如最后的清洗溶劑為緩沖溶液或水溶性有機(jī)溶劑,而分析手段為反相HPLC,固相柱上的殘留水對(duì)分析影響不大。但是,當(dāng)洗脫劑為非水溶性有機(jī)溶劑或分析手段又為GC或GC-MS時(shí),固相柱的干燥就顯得特別重要。
  5.目標(biāo)分析物的洗脫:
  選擇洗脫溶劑時(shí)必須考慮有足夠強(qiáng)度的洗脫劑,要以最小用量的洗脫劑將盡可能多的目標(biāo)分析物洗脫下來(lái);同時(shí)還要兼顧洗脫劑必須有足夠的選擇性,選擇只將目標(biāo)分析物洗脫,而吸附力強(qiáng)的雜質(zhì)保留在柱上。

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