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氯化血紅素的檢測方法

來源:浙江聯(lián)碩生物科技有限公司   2022年12月28日 09:09  

關(guān)于氯化血紅素檢測方法的文章及報(bào)道主要有紫外光譜法、熒光法、紅外光譜法、極譜法、可見光分光光度法、電極法等。

紫外和紅外光譜法

兩種光譜法原理類似,均是利用標(biāo)準(zhǔn)品與樣品的紅外光掃描譜圖和紫外光掃描譜圖進(jìn)行比對(duì),對(duì)圖譜的走向以及變化趨勢進(jìn)行比較。在紅外光掃描譜圖中,如果樣品與標(biāo)準(zhǔn)品具有相同的吸收特征,掃描譜圖形狀大體一致,可以以此說明試驗(yàn)所得樣品為氯化血紅素。在紫外光掃描譜圖中,標(biāo)準(zhǔn)品在波長為 380-410nm 范圍內(nèi)有最大吸收,但是因?yàn)槿軇┑牟煌?,?huì)導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)品的最大吸收波長也不同。在相同實(shí)驗(yàn)條件下,如果樣品在同一波長處具有最大吸收,該方法可作為氯化血紅素的定性鑒定。袁曦對(duì)氯化血紅素口服液采用紫外光譜法對(duì)其氯化血紅素含量進(jìn)行檢測,采用波長為384nm 處對(duì)抗貧口服中的氯化血紅素進(jìn)行測定,結(jié)果表明在1.80-9.10ug/mL 線性范圍內(nèi),R=0.9999,標(biāo)準(zhǔn)差是 0.67%,方法的平均回收率達(dá)到99.3%。

熒光法

熒光法是利用血紅素中卟啉的熒光特性,利用熒光光度計(jì)可檢測出樣本的熒光強(qiáng)度,從而計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量,如糞便中血紅素的定量測定,血紅蛋白在腸道中消解為血紅素,血紅素在腸道內(nèi)細(xì)菌的作用下,大部分被消解為卟啉,利用卟啉的熒光特性,可計(jì)算其相應(yīng)的血紅素含量。血紅素與草酸試劑共熱能脫去亞鐵離子,并被還原成具有熒光特性的卟啉,此條件下利用熒光法所測得的卟啉為腸道中全部的血紅素量。消解的血紅素除以血紅素總量即為血紅素腸道轉(zhuǎn)換率,由于出血部位越高,被消化吸收的時(shí)候越長,腸道的轉(zhuǎn)換率也越高,所以從腸道轉(zhuǎn)換率可以大概推算出腸道出血的部位。

可見光分光光度法

將血紅素溶解于 0.25%Na2CO3溶液中,在波長為 610nm 處有最大吸收峰值,楊淑琴在血紅素的鹽酸丙酮法提取工藝中有用該法對(duì)血紅素的含量作了測定。

極譜法

通過研究血紅素的極譜行為,以0.1mol/L NH3-NHCl 作為緩沖溶液,血紅素在-0.42V點(diǎn)出現(xiàn)一個(gè)靈敏的陰極波。利用該方法可檢測出zuidi血紅素濃度為8×10mol/L。

電極法

該法采用修飾后的石墨電極檢測血紅素,發(fā)現(xiàn)電極對(duì)血紅素的濃度反應(yīng)比較靈敏,濃度在 1×10~1×10mol/L范圍內(nèi)血紅素與電極反應(yīng)成線性關(guān)系。

其他

除了上面的方法外,還有一些關(guān)于測定氯化血紅素的方法。袁曦在水浴加熱加熱條件下利用氫氧化鈉溶液將氯化血紅素溶解,冷卻后加入硫酸,晃勻后立即產(chǎn)生棕色沉淀。過濾后取濾液加硫氰酸銨試液數(shù)滴,溶液呈棕紅色。此顯色反應(yīng)可用作氯化血紅素的定性檢測。


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