流 式 細 胞 術：

是當代zui/xian/jin的細胞定量分析技術之一，它是在流動的狀態下，快速地檢測細胞或顆粒的特異性指標，實現對多個檢測目標多參數特性分析。具有特異性強，靈敏度高，速度快，可分析、可分選的特點。流式細胞術檢測信號分為散射光信號和熒光信號兩種。

散 射 光 信 號
散射光信號分為前向散射光和側向散射光，前者也叫小角度散射光，后者也叫90°角散射光。

前向散射光（forward scatter, FSC）是正向收集的散射光信號。一般來說，FSC可以反映細胞的大小，FSC強則細胞大一些，反之則細胞小一些。但當檢測目標為非球形細胞（如紅細胞、精子等），由于細胞在液流系統中的朝向不一致，通過激光檢測時容易出現同型細胞FSC差別很大，這個需要特別注意。

側向散射光（side scatter, SSC）是側向收集的散射光信號。SSC對細胞膜、胞質、核膜的折射率更為敏感，其強度與細胞內部的精細結構和顆粒性質有關。通常，一個細胞內部細胞器和顆粒越多，其SSC就越強。

利用FSC/SSC雙參數測定，可以從一些未添加熒光染料的樣本中鑒別出若干個細胞亞群。最為經典的就是利用FSC/SSC雙參數將人外周血白細胞分為淋巴細胞、單核細胞和粒細胞三個亞群（如下圖），淋巴細胞FSC和SSC均較小，單核細胞FSC較大、SSC中等，粒細胞FSC和SSC均較大。

熒 光 信 號

熒光信號也分為兩種。一種是細胞自身就有的熒光在激光照射下發出的熒光信號，稱為細胞自發熒光；另一種是人為用特異性熒光素標記細胞，如用熒光素標記的單克隆抗體特異性地結合胞膜、胞質、核膜的相應抗原，這些熒光素通過激光激發產生的信號。熒光信號的強弱反映了細胞抗原的表達含量，通過熒光信號我們可以對細胞亞群和功能進行

熒光素的選擇一般遵循幾個原則：① 儀器需滿足激光管可激發相應的熒光素且可同時檢測所需的熒光；② 染料的亮度與抗原表達量相匹配，低表達抗原，推薦使用亮熒光染料，高表達抗原，推薦使用弱熒光染料；③ 盡量選擇光譜重疊小的熒光素，光譜重疊嚴重的熒光素同時檢測會導致熒光溢漏，需調節補償；④ 盡量使用紅色激光激發自發熒光高的樣本。

流式細胞術的應用頗為廣泛，利用兩種檢測信號可實現對細胞大小、顆粒度及內部結構（如細胞器）、細胞狀態（凋亡/周期）、細胞內離子（Ca2+、pH、ROS）、細胞表型等的檢測分析。