臺式大容量離心機的分離條件如何有效確定?
臺式大容量離心機的分離技術是根據顆粒在一個實用離心場合中的狀態而發展起來的新技術。不同密度、大小或形狀的顆粒在不同的離心場合中沉降,所以一個大體是球形非均一的混合物,可以用離心的方法加以分離,應用離心機是為了進一步研究生物化學分離大量的物質。例如收集細胞,分離血漿,從這些預純化的制劑中分離DNA和蛋白質分子,并可分離出病毒以及大規模大腸桿菌,嚴細胞成分,核蛋白微粒等。
臺式大容量離心機在生物行業主要用于各種生物樣品的分離、純化和制備:
1.低速離心機主要用于細胞、細胞核、細胞膜的沉淀和收集等;
2.高速離心機主要用于制備和收集微生物、細胞碎片、大的細胞器等;
3.超高速離心機主要用于分離、提純、鑒定和分析線粒體、微粒體、染色體、溶酶體、質粒、大分子核酸、高分子蛋白質等。
臺式大容量離心機的分離條件確定無外乎這幾點:
1.轉速
離心力大小取決于轉子的轉速和離心半徑。在說明離心條件時,低速離心通常以轉子每分鐘的轉數(rpm)表示。在高速離心,特別是超高速離心時,往往用相對離心力(RCF)表示。實際工作中,離心力通常指相對離心力的平均值,即離心管中點的離心力。
2.分離時間
分離時間因離心方法不同而有差別:對于差速離心,分離時間是指顆粒*沉降到離心管底的時間;對于速率區帶離心,分離時間是指形成界限分明的區帶的時間;對于等密度區帶離心,分離時間是指顆粒*到達等密度點的平衡時間;對于速率區帶離心所需的區帶形成時間和等密度區帶離心所需的平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗確定。
3.分離溫度
為防止分離物質的凝集、變性和失活,除了注意離心介質的選擇外,還必須控制好分離溫度,分離溫度一般控制在4℃左右。對于熱穩定性較好的物質,可在室溫下進行離心分離。在高速離心或超高速離心時,轉子高速旋轉會發熱從而引起溫度升高,必須采用冷凍系統,使溫度保持在一定范圍內。
4.介質溶液PH值
離心介質溶液PH值應該處于分離物質穩定的PH范圍內,必要時可采用緩沖液。另外,過酸、過堿可能引起轉子和離心機其它部件的腐蝕,應盡量避免。
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