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PBS和D-PBS緩沖溶液的配制方法

來源:上海研啟生物科技有限公司   2022年07月14日 16:11  

磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)的是生物化學(xué)中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液,這種由鹽溶液中含有氯化鈉,磷酸鹽,磷酸鹽,氯/化鉀和磷酸鉀組成。組份濃度:137 mM 氯化鈉,2.7 mM 氯/化鉀,10 mM 磷酸二/氫鈉,2 mM 磷酸二氫鉀。本文總結(jié)了PBS和D-PBS溶液的配制方法。

 

1. 常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液

組成成份:

磷酸二氫鉀 34 g

1 mol/L氫氧化鈉溶液 175 ml

蒸餾水 825 ml

PH 7.2

配制:

先將磷酸鹽溶解于500 mL蒸餾水中,用1 mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后,再用蒸餾水稀釋至1000 mL。

稀釋液:

取儲存液1.25 mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL。分裝每瓶100 mL或每管10 mL,121 ℃高壓滅菌15 min。

用途:

主要用于一些化學(xué)實驗中不影響實驗反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值,以便讓實驗的化學(xué)反應(yīng)在最佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。

2. PBS Buffer的配制具體步驟

組份濃度:

137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4

配制量:

1 L

配制方法:

(1)稱量下列試劑,置于1 L燒杯中。

NaCl 8 g

KCl 0.2 g

Na2HPO4 1.42 g

KH2PO4 0.27 g

(2)向燒杯中加入約800 ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>

(3)滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至7.4,然后加入去離子水將溶液定容至1 L。

(4)高溫高壓滅菌后,室溫保存。

注意:

上述PBS Buffer中無二價陽離子,如需要,可在配方中補充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

3. D-PBS是杜氏磷酸緩沖液

全稱為:Dulbecco's Phosphate Buffered Saline

組分 分子量 濃度 (gm/L) 摩爾濃度 (mM)

氯/化鉀 (KCl) 75 0.20 2.67

磷酸二氫鉀 (KH2PO4) 136 0.20 1.47

氯化鈉 (NaCl) 58 8.00 138.00

磷酸/氫二鈉 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10

pH值為7.4。

(1)杜氏磷酸鹽緩沖液(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline,D-PBS)也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些,并含有鈣鎂離子。D-PBS主要用于胚胎學(xué)方面的研究,多用于胚胎的沖洗液、凍存液和培養(yǎng)液。

(2)D-PBS配方:氯化鈉8 g,氯/化鉀0.2 g,磷酸/氫二鈉1.15 g,磷酸二氫鉀0.2 g,氯化鈣0.1 g,含6個結(jié)晶水的氯化鎂0.1 g溶于1 L ddH2O中。

(3)以上配方為含有鈣鎂離子的D-PBS,如不加氯化鈣和氯化鎂,即為無鈣鎂的D-PBS。

(4)在以上配方的基礎(chǔ)上,還可以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等,以更利于培養(yǎng)物的生長。

D-PBS是杜氏磷酸緩沖液,也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規(guī)磷酸緩沖液最大的不同點在于磷酸鹽的含量稍低些,根據(jù)是否含鈣鎂分為兩種即D-PBS w/鈣 & 鎂和D-PBS w/o 鈣。


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