想知道該如何使用暗視場(chǎng)生物顯微鏡那就趕緊看看那本篇吧
在我們的日常生活中,室內(nèi)飛揚(yáng)的微粒灰塵是不易被看見(jiàn)的,但在暗的房間中如果有一束光線從門(mén)縫斜射進(jìn)來(lái),光束中灰塵便可見(jiàn)了,這是光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象。
暗視場(chǎng)生物顯微鏡就是利用此原理設(shè)計(jì)的。它的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要是使用中央遮光板或暗場(chǎng)聚光器,常用的是拋物面聚光器,使光源的中央光束被阻擋。
不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光線改變途徑,傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上,標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射,散射的光線投入物鏡內(nèi),因而整個(gè)視野是黑暗的。
在暗場(chǎng)中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像.并非物體的本身,所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng),不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。
但被檢物體為非均質(zhì)時(shí),并大于1/2波長(zhǎng),則各級(jí)衍射光線同時(shí)進(jìn)入物鏡,在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。
一般暗視場(chǎng)生物顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu),但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng),這是普通顯微鏡(大的分辨力為0.2um)所不具有的特性,可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。
暗視場(chǎng)生物顯微鏡的使用方法:
1.安裝暗場(chǎng)聚光器檢查聚光器的光軸(并非晶體光軸而指幾何光學(xué)光軸)是否與顯微鏡的光路一致。聚光鏡用中心調(diào)節(jié)旋鈕合軸調(diào)整之后,圈錐光束的交點(diǎn)集中到標(biāo)本平面上。
2.放標(biāo)本放置標(biāo)本時(shí)在聚光鏡前透鏡與載物片之間必須浸油。否則來(lái)自標(biāo)本細(xì)節(jié)的反射光和衍射光束在載物玻片表面進(jìn)行全反射。觀察結(jié)果趨于失敗。
3.調(diào)節(jié)聚光鏡焦點(diǎn)操縱光源會(huì)聚透鏡務(wù)使圓錐形光束的交點(diǎn)照射到標(biāo)本平面上。
4.迭擇物鏡用于暗場(chǎng)觀察的物鏡中.油浸系或水浸系的物鏡不能使用。就是干燥系物鏡中也要挑選鏡率在0.85以下為好。
如果物鏡鏡口率過(guò)大時(shí),來(lái)自聚光鏡的部分直射光束進(jìn)入物鏡前透鏡,從而干擾暗視野成像效應(yīng)。如果使用油浸系物鏡觀察時(shí),必須調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)裝孔徑光欄。
5.光強(qiáng)的選擇暗場(chǎng)顯微鏡中光能損失太大。因此必須選擇光強(qiáng)Zui大的光源,才能取得較好效果。尤其以超聚光鏡觀察膠體微粒運(yùn)動(dòng)時(shí),光強(qiáng)愈大愈好.
6.浸油的方法聚光鏡與載玻片間浸油時(shí)特別注意是否有氣泡。氣泡可招致暗視野觀察效果的*破壞。
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