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1、使用前：使用一次性抽吸移液管時，先看移液器標記、精度等級、刻度位置等，使用前應先用鉻酸洗液潤濕移液器內壁的油漬。然后用自來水沖洗殘留的洗劑，再用蒸餾水清洗。清潔后的移液器內壁不得有水滴掛住。取溶液前，用濾紙吸去移液管末端內外的水分，然后用待取溶液沖洗管壁2～3次，保證取溶液濃度不變。
2、吸液：右手拇指和中指握住吸液管上端，將吸液管下口插入待吸液中。插入不宜過淺或過深，一般為10～20mm。如果太淺，會導致空吸。將溶液吸入洗耳球，將溶液弄臟，如果太深，會粘在管外的溶液過多。左手握住洗耳球，先將洗耳球清空，然后將球尖連接到移液管上口，慢慢松開壓扁的洗耳球，將溶液吸入管內，先吸約1/3、用右手食指按壓管口，取出，水平握住，旋轉管子，使溶液與水垢上方部分接觸，以置換管內水。內壁，然后從管的下口排出并丟棄溶液。反復洗滌3次后，即可吸收水垢上方的溶液，立即用右手食指按住管口。
3、調整液位：將一次性抽吸移液管向上提離液面高度，移液管末端仍靠在溶液容器內壁上，管體保持直立，食指稍微松開（有時輕輕旋轉移液管)使管內溶液從下口緩慢流出，直至溶液彎液面底部與標記線相切，立即用食指按壓管口?？吭诒谏系囊旱稳〕?，將其從移液器中取出，然后將其插入接收溶液的容器中。
4、放液：如果盛放溶液的容器是錐形瓶，將錐形瓶傾斜30°，移液管豎直，管子下端緊貼錐形瓶內壁，稍微松開食指，讓溶液慢慢流下瓶壁。待溶液全部流出后，15s后取出移液管，使附著在管壁上的部分溶液流出。如果移液器沒有標有“吹”字樣，則無法吹出移液器殘留的溶液，因為這部分殘留溶液不包括在移液器的校準體積內。
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