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768道基因合成儀反應步驟

來源:昆山伯利克精密儀器有限公司   2022年01月05日 14:18  
  768道基因合成儀儀器硬件易于操作,只需將反應板放在儀器中,便可開始合成。維護簡單快捷。更換管子或閥門很容易。所使用耗材具有廣泛的兼容性,既能使用預裝填合成柱,也可以使通用合成柱。智能清污排水系統在用真空系統排空柱之前、期間和之后;標準氬氣或氮氣吹掃柱上部隔絕空氣和水氣,并且氣體的使用量非常低。提供給試劑瓶的惰性氣體由儀器中的兩個不同調節器調節。一個調節單體和活化劑瓶的壓力,另一個調節其他瓶子的壓力。每個調節器都有一個壓力計來指示該試劑的壓力。

  768道基因合成儀合成技術原理:
  采用固相亞磷酰胺三酯法合成DNA的片段,它具有高效、快速的偶聯以及起始反應物比較穩定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在固相載體.上完成DNA鏈的合成的,合成的方向是由待合成引物的3'端向5'端合成的,相鄰的核苷酸通過3'→5'磷酸二酯鍵連接。

  768道基因合成儀反應步驟:
  1.將預先連接在固相載體CPG上的活性基團被保護的核苷酸與三氯*酸反應,脫去其5'-羥基的保護基團DMT ,獲得游離的5'-羥基。
  2.亞磷酰胺保護的核苷酸單體, 與活化劑四氮唑混合.得到核苷亞磷酸活化中間體. 它的3'端被活化,與CPG載體上連接堿基的5'-羥基發生縮合反應。
  3.帶帽(capping)反應。縮合反應中會有少量5"-羥基沒有參加反應.用乙酸酐和1-甲基咪唑封閉5"-羥基,使其不能再繼續發生反應,這種短片段在純化時可以分離去除。
  4.在氧化劑碘的作用下,亞磷酰形式轉變為更穩定的磷酸三酯。


768道基因合成儀

 

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