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市面上的分光光度計通常有兩種光路方案：單光路和雙光路。
單光路方案采用一個光源和一個光路，將光信號通過樣品或從樣品表面反射，其光路簡單，成本低，但對光源和傳感器的穩定性有很高的要求，對環境也較敏感。
雙光路方案有雙光源雙光路和單光源雙光路兩種，其中單光源雙光路系統通過斬波器將單色儀分出的光線分位兩路。雙光路系統的兩束光一束作為檢驗光，通過樣品或被樣品反射，另一束作為參考光，經過參比池或空氣。雙光路方案的優點是補償了由于電源電壓變動引起的電源強度改變，提升了檢測的穩定性，降低了噪聲和漂移。
分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用和保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度有重要作用。
1.對儀器工作環境的要求
分光光度計應安裝在穩定的工作臺上，(周圍不應有強磁場, 以防電磁干擾)，室內溫度應保持在(10～30)℃。室內應干燥，相對濕度宜控制在<85 %，室內應無腐蝕性氣體，光線不宜過強。
2.儀器保養和維護方法
(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10 %的電壓波動。為保持光源燈和檢測系統的穩定性，在電源電壓波動較大的實驗室最好配備穩壓器。
(2)為了延長光源使用壽命，在不用時不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩定，應及時更換新燈。更換后要調節好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內，不能拆開，為防止色散元件受潮發霉，必須經常更換干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池，保護吸收池光學面。
(5)光電轉換元件不能長時間曝光，應避免強光照射或受潮積塵。
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