0512高效液相色譜法“方法轉換”

2015版與2020版藥典中“色譜參數調整”比較

2015年版《中國藥典》0512通則規定：品種正文項下規定的色譜條件（參數），除填充劑種類、流動相組分、檢測器類型不得改變外，其余如色譜柱內徑與長度、填充劑粒徑、流動相流速、流動相組分比例、柱溫、進樣量、檢測器靈敏度等可適當調整。

2020版藥典全面增訂“色譜參數允許調整的范圍”，品種項下條件不再是固定的，本次增訂內容提供了“使用不同粒徑、內徑色譜柱的液相色譜方法轉換的操作準則”，用戶可依據通則進行HPLC法向UHPLC法轉換，可有效較少單針分析時間，提高分析通量，減少儀器用電耗能、人工成本、廢液處理成本、試劑成本。

注：表格來自《中國藥典》2020年版四部 0512通則

可通過相關軟件計算表中流速、進樣體積和梯度洗脫程序的調整范圍，并根據色譜峰分離情況進行微調。

島津方法轉換應對方案

面對標準變化和用戶需求，島津提供“方法轉換工具”、超高效液相色譜儀、色譜柱整體解決方案助力用戶應對方法轉換。

島津方法轉換工具

島津方法轉換工具特點

•全中文界面，操作簡便，既支持獨立運行，亦可嵌入LabSolutions工作站運行，可兼容不同的島津機型，產品系列、型號和產品圖可視化。

•內置ChP（中國藥典2020年版）計算公式，自動計算流速、進樣體積、梯度洗脫程序；內置流速自定義輸入框，如調整，軟件自動同步計算調整后的梯度程序。

•內置梯度模式、混合器體積、最大進樣體積、死體積及檢測池體積選擇項目，方便用戶進行系統匹配。

•可實現梯度開始時間或梯度程序的調節，梯度表折線圖及轉換前后梯度疊加圖顯示可視化；速度提升倍數、節約溶劑量顯示可視化，助力成本核算。

•L/dP值自動計算，自動計算參考范圍（0512通則色譜參數允許調整的范圍），自動檢查是否超范圍與超出參考范圍提示（紅色標記，評價區文字提示）。

•儀器系統壓力預測，自動提示是否超出型號耐壓限值并給出提示，指導選擇合適型號儀器與色譜柱可為儀器選型和色譜柱規格選擇提供參考。

使用方法

1點擊初始方法和目標方法下對應系列按鍵，進入設置界面，選擇轉換前后的儀器型號，梯度模式和混合器體積。

2先后輸入當前HPLC使用色譜柱和計劃轉換后UHPLC使用色譜柱規格，需注意L/dp 值應在原有數值的-25%～+50%范圍內。

3左側輸入轉換前HPLC色譜方法條件，軟件自動計算轉換后條件數值。

4左側梯度表輸入當前HPLC梯度程序，右側即會自動轉換為UHPLC梯度。

5評價區智能提示超限項目。

使用注意事項

為獲得良好方法轉換效果及高匹配色譜圖表現，建議使用同一品牌同一系列（如Shim-pack系列）或者性能相近的色譜柱。

對于梯度分析， 系統延遲體積對于分析影響較大，需要注意HPLC和UHPLC使用儀器混合器體積差異，并在軟件設置模塊輸入相應參數。

不同LC平臺選擇和對應色譜柱選擇

島津多系列HPLC可以滿足用戶不同分析需求，選擇和 LC 液相系統更為匹配的色譜柱可以獲得更高的分離效率，如下表格總結了針對不同的液相系統配置如何選擇色譜柱。

應用案例

赤芍配方顆粒HPLC轉化為UHPLC法

轉換成UHPLC法后，分析效率提升至原來的3倍以上。轉換成UHPLC法后，特征峰順序、數量、RRT、相對峰面積均符合標準規定。

銀杏葉提取物UHPLC法轉化為HPLC法

轉換前后，各色譜峰出峰順序和個數保持一致，指紋圖譜相似度均達到0.90以上。