ELISA試劑盒加樣的具體步驟，即加標(biāo)本，加酶物，加底物。

凍住血清融解后，蛋白質(zhì)有些濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上激烈振動。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑， 而血清標(biāo)本只要待血清天然凝結(jié)、縮短后即可獲得。也可在板孔中參加稀釋液，再在其參加血清標(biāo)本，然后在微型震動器上震動1分鐘以確保混和。通常說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一星期測定的需低溫冰存。可用作ELISA測定的標(biāo)本非常廣泛，體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體 或抗原成份，ELISA試劑盒中本次實驗不需用的有些應(yīng)及時放回冰箱保存。

ELISA試劑盒血清標(biāo)本可按慣例辦法收集，應(yīng)留心防止溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標(biāo)本也許會增加非特異性顯色。如在冰箱中保存過久，其間的可發(fā)作聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。板式ELISA各個操作過程的留心要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器合作使用，嚴(yán)格遵循劃定操作，必能得出的成果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留心不行濺起，不行產(chǎn)憤慨泡。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清，可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。

ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)維修通常均用板式點。除特別情況外，在醫(yī)學(xué)維修中均以血清作為檢查標(biāo)本。加酶物使用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液過程敏捷完結(jié)。如有細菌污染，菌體中也許富含內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)作穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。杰出的儀器和的操作是確保ELISA試劑盒檢查成果牢靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清 、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。