1. 適度消化細胞：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落，2min足矣，P19Cl6和293細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養基打散。

    2. hao用塑料瓶培養，如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養瓶，或者用鹽酸對培養瓶進行蝕刻，或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA，也可以幫助細胞貼附新的培養瓶，細胞不易貼壁，建議加多聚賴氨酸處理。

    3. 正確配制消化液或培養液。

    4. 使用合適的細胞外基質或貼壁試劑。

    5. 復蘇新的細胞，DI 一周用20%血清幫助細胞復原。

    6. 傳代接種一定要鋪的均勻，避免細胞抱團生長。

    7. 細胞傳代24小時之內，Hao不要晃動，以免影響貼壁。

    8. 體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜上，因此培養在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細胞培養，可以用γ射線照射后的3T3細胞為飼養層，另外降低pH、Ca2+含量和溫度，均有利于上皮細胞生長。