在微生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)、分子生物學(xué)、毒理學(xué)、酶學(xué)、疫苗制備、藥品生產(chǎn)等等領(lǐng)域的實(shí)驗過程中，都需要應(yīng)用各種細(xì)菌，儲備標(biāo)準(zhǔn)菌種、參考菌種、特殊菌種是bi不可少的，下面就幾種實(shí)驗室菌株的保存方法簡述如下。

　　1  斜面低溫保存法

　　將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，得到充分生長后，用封口膜封口，貼上標(biāo)簽，保存于4℃的冰箱中。此法操作簡單、使用方便、不需要特殊設(shè)備，是實(shí)驗室菌種保存z常用的方法。但保存時間短，一般每個月都要移種1次，而且菌種容易變異，所以此方法只適合實(shí)驗室短期實(shí)驗菌株的保存。

　　2  半固體瓊脂法

　　用接種針將以分純的待存菌，穿刺接種于半固體中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，封上無菌的液體石蠟，貼上標(biāo)簽，放4℃冰箱保存。此方法簡便易操作，不需特殊設(shè)備、技術(shù)難度不大，但保存的時間不長，一般只能保存1年以內(nèi)，而且對抵抗力弱以及一些特殊菌種大概只能存活3～6個月，需要頻繁的傳代，這樣很容易使菌株受到污染、變異。所以此方法不適用菌種的長期保存，只適合實(shí)驗室一些要求不高的菌種的短期保存。

　　3  液體石蠟保存法

　　將液體石蠟滅菌，放于37℃恒溫箱中，使水汽蒸發(fā)掉備用。再將已分純的待存菌在最適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使得到健壯的菌體，用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟，注入已長好的斜面培養(yǎng)基上，用量以高出斜面1cm為準(zhǔn)，將試管直立，貼上標(biāo)簽，置4℃下保存。此法制作簡單，不需要特殊設(shè)備，菌種可以保存1年左右不需要經(jīng)常移種，缺點(diǎn)是保存的時候需要直立放置。此方法適合實(shí)驗室短期菌株的保存，而且保存時需要一定的空間。

　　4  高層半固體瓊脂石蠟保存法

　　將待存菌經(jīng)平板劃線分離后，挑單個菌落用接種針反復(fù)穿刺接種到高層半固體瓊脂培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，用滅菌過的液體石蠟滴加到半固體瓊脂菌種管表層約0.5cm高度，貼上標(biāo)簽，存放4℃冰箱。此法操作簡便，不需要特殊設(shè)備，效果好，可以保存菌株1～2年。所以適合實(shí)驗室菌株的較長期的保存。

　　5  紙片法

　　將已分純的待存菌用無菌鑷子鑷取紙片，在紙片上刮取4～5個菌落，放入凍存管內(nèi)，蓋上蓋子后用封口膠布封住邊緣，貼上標(biāo)簽，放入冰箱冷凍保存（－20℃左右）。此方法具有操作簡單、不需特殊設(shè)備、經(jīng)濟(jì)實(shí)用、保存空間小等，而且保存時間至少2年，但對一些營養(yǎng)要求比較高的菌種，存活率不理想。所以此方法適合實(shí)驗室一些營養(yǎng)要求不高的菌種較長時間的保存。

　　6  甘油液保存法

　　將已分純的待存菌接種于肉湯中，37℃培養(yǎng)18～24h，然后按5份肉湯溶液、2份甘油－生理鹽水保存液的比例分裝于滅菌的微量離心管或細(xì)胞凍存管中，貼上標(biāo)簽，置－80℃～－20℃冰箱保存。此法操作簡便，不需要特殊設(shè)備，效果好，可以保存菌種3年左右，無變異現(xiàn)象，而且此方法還可以保存一些要求較高的特殊菌種，適用范圍廣。所以此方法適合實(shí)驗室普通菌種或特殊菌種的較長期的保存