細胞裂解液各成分的作用:
1、第一種50mmol/L Tris-HCl是緩沖液,保證細胞裂解時PH值也能穩(wěn)定,Tris是一種有機堿。
2、第二種1.0 mmol/L EDTA是一種金屬螯合劑。
3、第三種150 mmol/L NaCl是等滲體系電解質(zhì),用于協(xié)調(diào)細胞膜內(nèi)外離子平衡。
4、第四種0.1% SDS是十二烷基硫酸鈉,是一種表面活性劑和還原劑,有增溶作用。
細胞裂解及方法簡介:
細胞裂解是改變細胞通透性和活性的重要實驗方法。主要分為化學(xué)法和機械法,前者比較溫和,后者雖然產(chǎn)量高,但反應(yīng)更劇烈,很有可能造成細胞中的DNA斷裂。
裂解方法包括化學(xué)裂解、酶裂解和機械裂解。化學(xué)裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法,通常會很少使DNA 斷裂。這兩種方法(包括SDS 和溶菌酶處理等)提取純化DNA中常用的方法。
機械裂解可以更均一的裂解細胞,同化學(xué)裂解相比,機械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機械處理可以更劇烈和全面的裂解細胞,但也會造成DNA 的斷裂。
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