美國藥典（USP）擬定新通則<1469>NITROSAMINE IMPURITIES，用于對制藥行業(yè)可能存在亞硝胺雜質(zhì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和控制。該標(biāo)準(zhǔn)的目的是為控制亞硝胺雜質(zhì)、消除或減少亞硝胺雜質(zhì)在藥物產(chǎn)品中的存在提供一種基于科學(xué)的方法。目前該通則已結(jié)束修訂，預(yù)計(jì)今年下半年正式出版。

建議相關(guān)的原料藥/制劑/輔料生廠商和供應(yīng)商、合同制生產(chǎn)組織、藥品檢測和監(jiān)管機(jī)構(gòu)、QA/QC專家參考該通則。

USP<1469>與FDA亞硝胺雜質(zhì)指南基本一致，并且都主張采用基于風(fēng)險(xiǎn)的方法進(jìn)行評(píng)估。USP<1469>確定的應(yīng)在藥品中檢測的六種亞硝胺包括：N-亞硝基二甲胺（NDMA）、N-亞硝基二乙胺（NDEA）、N-亞硝基二異丙胺（NDIPA）、N-亞硝基乙基異丙胺（NEIPA）、N-亞硝基二丁胺（NDBA）和N-亞硝基甲基氨基丁酸（NMBA）。USP 清單與 FDA 清單的不同之處在于 FDA 清單中的化合物N-亞硝基甲基苯胺（NMPA）不在 USP 清單中。

與FDA一樣，USP<1469>要求對潛在的亞硝胺進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)，在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中應(yīng)充分考慮可能引入亞硝胺的所有潛在來源，包括：

原料藥工藝過程：原料、試劑、溶劑、加工助劑等

原料藥降解物

溶劑降解物

來自于原料、溶劑（回收溶劑）、試劑、催化劑的雜質(zhì)

來自于中間體和中間體生產(chǎn)帶來的雜質(zhì)

來自于水、輔料、加工助劑的雜質(zhì)

制劑加工或包裝材料引入或產(chǎn)生的雜質(zhì)

亞硝胺雜質(zhì)的產(chǎn)生機(jī)理

此外USP<1469>還遵循 FDA 指南，確保藥物中的亞硝胺雜質(zhì)每日攝入量不超過可接受攝入量（Acceptable Intake，簡稱AI）。FDA 規(guī)定 NDMA 和 NMBA 的AI為 96 ng/day，NDEA、NMPA、NIPEA 和 NDIPA 的AI為 26.5 ng/day。再結(jié)合藥品活性成分的每日最大服用劑量（Maximum Daily Dose，簡稱MDD）確定亞硝胺雜質(zhì)的在該藥品中的（濃度）限度（AI/MDD）。

通則要求單個(gè)亞硝胺雜質(zhì)不超過AI對應(yīng)的限度，同時(shí)對檢出濃度超過LOQ但不超過AI對應(yīng)限度的多個(gè)雜質(zhì)需咨詢權(quán)威機(jī)構(gòu)。筆者注：建議參考FDA的要求。

為了幫助供應(yīng)商更好地檢測亞硝胺雜質(zhì)，USP<1469>提出了四種分析方法，生產(chǎn)商可以使用這些方法來檢測其產(chǎn)品中是否存在亞硝胺。

與EP 2.5.42僅限于原料藥不同，USP <1469>適用于原料藥以及制劑，同時(shí)要求生廠商對輔料、制劑生產(chǎn)工藝、包裝系統(tǒng)做評(píng)估。下表簡單列出二者的差異，供讀者參考。

島津可以為客戶提供USP<1469>通則中的所有4種方法：

關(guān)于USP<1469>方法2，原文“Procedure 2: Quantitation of NDMA, NDEA, NDIPA, and NEIPA in selected sartans by GC–MS”，其實(shí)看接下來的條件，我們發(fā)現(xiàn)分析條件：“Injector: Headspace”，“Acquisition mode：multiple reaction mode (MRM)”，頂空進(jìn)樣+MRM質(zhì)譜模式，其實(shí)是HS+GC-MS/MS。

應(yīng)用案例1

島津海外應(yīng)用工程師參考USP<1469>方法2，對氯沙坦中的亞硝胺雜質(zhì)進(jìn)行了研究，在第二法適用的4種亞硝胺（NDMA、NDEA、NDiPA、NEiPA）進(jìn)行了擴(kuò)充，增加NDBA、NDPA和NMPrZ。設(shè)定MDD為880mg/day，計(jì)算代表性的亞硝胺雜質(zhì)限度，如下表：

使用島津HS-20和GC-MS/MS對方法進(jìn)行研究，考察線性、準(zhǔn)確度（回收率）、LOQ等參數(shù)，結(jié)果如下：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，島津儀器性能超越了USP<1469>通則方法的要求，并且擴(kuò)充了方法的適用范圍，可以為制藥企業(yè)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供精準(zhǔn)的幫助！

應(yīng)用案例2

參考<1469>方法3，使用島津三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀對奧美沙坦制劑中的六種亞硝胺（NDMA、NDEA、NDIPA、NDBA、NEIPA和NMBA）進(jìn)行檢測。

0.1ng/mL亞硝胺的MRM質(zhì)量色譜圖

數(shù)據(jù)展示：0.1 ng/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液的MRM色譜圖如上圖（該濃度是FDA要求的定量限值的 1/10）。在0.1 - 10 ng/mL濃度范圍內(nèi)的線性系數(shù)>0.99，該濃度范圍內(nèi)的精密度在80 - 120%，結(jié)果優(yōu)異。

更多應(yīng)用信息請聯(lián)絡(luò)島津工作人員！