選擇安捷倫液相色譜柱時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題?
安捷倫液相色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞,選擇合適的色譜柱可以縮短法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間,并且使方法更具穩(wěn)定性。
液相色譜柱由檢測(cè)器、高壓液體泵及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關(guān)鍵,同時(shí)也是液相色譜工作者獲得正確且可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。
液相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。液相色譜柱的分離作用是在填料與流動(dòng)相之間進(jìn)行的,柱子的分類(lèi)是依據(jù)填料類(lèi)型而定,由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。
選擇安捷倫液相色譜柱時(shí)應(yīng)注意:
1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8),可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱,具有峰形好,重現(xiàn)性高和壽命長(zhǎng)的特點(diǎn),選用較短的柱子可以提高分離效率,選用較長(zhǎng)的柱子可以增加保留,選用小顆粒度的填料可以提高分離度,對(duì)分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。
2)分離極性大的組分采用色譜柱。
3)分離生物堿類(lèi)的化合物選用經(jīng)過(guò)烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。
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