隨著我國經濟與科研技術的提高,我們的色譜技術也在不斷的進步中,制備色譜技術也得以大力發展,現已逐漸走出實驗室,廣泛應用于生物、醫藥等分離純化領域的工業生產。
制備色譜概述
制備色譜源于從混合物中分離得到化合物純品,是一個分離、純化及富集的過程,已成為分離科學中較有效的分離技術之一。廣泛應用于生物、醫藥等分離純化領域的工業生產,我們稱之為工業制備色譜(IndustrialPreparationChromatography,簡稱IPC)。
制備色譜的目的
在說色譜制備之前,我們要先了解一下分析色譜,分析色譜的目的是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。而制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。工業制備色譜產品的主要用途是完成工業級樣品的純化、分離及富集。
制備色譜的結構組成
制備色譜一般由一臺可以連續輸送液體的恒流泵、紫外檢測儀與色譜柱構成,其中重要的部件是價格不一,款式多樣的色譜柱,這也是影響終制備效果的關鍵性環節。柱子有多種類型,不僅材質不一,填料也有很多學問,下面簡要的說說關于柱子的一些情況:
各種規格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到,而且價格低廉,但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小,且非常容易破碎。當由于壓力太小而導致流動相流速很慢的時候,高位液面或加高壓空氣(或者氮氣)的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空,也能在一定程度上解決這個問題。
不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能,但其價格相對很貴。如果,只有很小的分離任務且經費也允許,市面上直徑為1cm的小型制備柱就是首要選擇。
有機玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕,相對不銹鋼柱子而言,它是半透明的,可以看到液體的運行狀態,對有色的物質其特點就更為突出。
硅膠、鍵合固定相(如C18)、離子交換樹脂、聚酰胺、氧化鋁、凝膠等都可以作為色譜柱的填料。有不少文獻報道,對填料可以進行一下處理提高了分離效果,如,對硅膠進行的硝酸銀(或緩沖液)處理。
制備色譜的優勢特點
根據制備色譜型號的不同,特點會有些許的差異
1.分離過程壓力恒定,柱床穩定,重現性好
2.中壓制備,流速快,快速制備大量純品
3.流量及壓力設定可記憶,便于實驗操作
4.柱效高,不拖尾,可根據分離度過載上樣
5.排氣裝置設計,有效除去輸送液體中的氣泡
6.數顯控制流速,流速精確恒定
隨著更高的標準要求,制備色譜的發展趨勢將會是儀器一體化,操作自動化、耗品標準化以及滿足高通量純化要求。如果需要進行分離提純工作,那么不妨選擇制備色譜系統。
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