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有效液相色譜儀系統是解決生化分析的有效途徑

來源:杭州瑞析科技有限公司   2020年02月26日 14:58  

由于有效液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等眾多優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。可以預見的是有效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。

 

液相色譜儀

 

一、有效液相色譜儀檢測特點

有效液相色譜儀只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題*有前途的方法。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展很快如在環境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境污染分析擁有新的發展。

 

液相色譜儀

 

二、有效液相色譜儀分析的流程

由高壓泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統,然后輸出,經流量與壓力測量之后,導入進樣器。被測物由進樣器注入,并隨流動相通過色譜柱,在柱上進行分離后進入檢測器,檢測信號由數據處理設備采集與處理,并記錄色譜圖,廢液流入廢液瓶。遇到復雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似,不同的是氣相色譜改變溫度,而有效液相色譜儀改變的是流動相極性,使樣品各組分在**條件下得以分離。

1、*,液體對于氣體是有一定的溶解度的。液體的壓力越高,對氣體的溶解度越好。所以,當一瓶未開封靜置的可樂,你是看不到氣泡的,因為氣泡都溶解在里面了。當你開啟瓶蓋,直接的影響就是瓶子里面的壓力降低了,對氣體的溶解度變小,所以氣體就析出變成一個個的小氣泡。

2、喝過啤酒或者碳酸飲料的人都有這樣的經歷,當你搖晃瓶子,然后瞬間把瓶蓋開啟,啤酒或碳酸飲料瓶中會噴出大量泡沫,搖晃的越劇烈,噴射的越猛,不難看出,溶解氣體的液體在振蕩和運動過程中,也容易讓氣泡析出。

3、我們曾經懷疑過一個問題:把一升甲醇倒進一生純水里面,有效液相色譜儀的體積是不是兩升?當我們親自試驗后,就排除了這個疑問,而且我們可以明顯看到,當兩種液體混合的時候,會有大量的氣泡冒出,體積也小于兩升。

 

液相色譜儀

 

三、有效液相色譜的研究動向

1、縮短分析時間,提高分離效率。應用先進的檢測儀器和方法,對流動相、固定相進行調節或改變,采用梯度洗脫、柱切換技術有望解決這個問題。梯度洗脫的有效液相色譜法,能分析較寬極性范圍的樣品,較等度洗脫具有很大的優勢,但對于成分更復雜、極性范圍更寬的中藥樣品則有些力不從心。多柱有效液相色譜法又稱多維有效液相色譜法。除具有梯度洗脫一樣的改變流動相濃度的優點外,還可以改變固定相種類、鍵合度、粒徑、柱長、柱徑等及流動相種類、濃度等。

2、進一步向自動化、智能化及聯用技術上發展。液相色譜與質譜聯用在國外已成為測定低濃度生物藥品中藥物及代謝物的**方法,LC-MS-MS法測定血漿中HIV-1蛋白酶,準確有效,血漿中殘留的內源性組份和其他藥物不干擾測定,既節省材料又節約時間。已經應用于體液、血漿、血清中的藥物分析。中藥復方注射液“清開靈”中的膽酸類物的分析采用液質聯用,效果理想。有效液相色譜-核磁共振聯用在藥物分析方面的作用也更加清晰。新近提出的智能多柱有效液相色譜系統利用切換技術的模塊式分離性能,把樣品分塊的切換進不同性質的色譜柱,再用合適的流動相洗脫,全過程采用智能化自動控制,分析效果良好。

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