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對于懸浮細(xì)胞,該如何裂解?
我初次用Dual-Luciferase Reporter Assay法檢測Luciferase活性，在制備細(xì)胞裂解液時，由于我培養(yǎng)的是Raji懸浮細(xì)胞，無法按照Protocol上所說的關(guān)于貼壁細(xì)胞的方法（PBS漂洗后棄漂洗液和殘留培養(yǎng)基，再加入1X PLB，覆蓋單層細(xì)胞），該如何正確操作，以使懸浮細(xì)胞正常裂解以利于檢測？（特別是：對1X PLB加入的量、裂解的時間等有何講究？）謝謝！
對懸浮細(xì)胞來講，離心后PBS洗一遍，然后加裂解液。裂解的方法，一個是渦旋器震蕩2分鐘，在有就是超聲破碎，兩者可以結(jié)合使用
好。我做過相關(guān)的實驗。其實驗步驟如下：1。收集轉(zhuǎn)然后的細(xì)胞，1000r,5min.2.用無血清培養(yǎng)基或者PBS洗一遍。1000r,5min；3.加入1×PLB，在室溫放置15分鐘，然后迅速凍融，12000r,5min；4.熒光素酶雙報告系統(tǒng)檢測
這是我們實驗室多次實驗后總結(jié)的方法，很好用的！我們實驗室現(xiàn)在都這么做！
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