《液相色譜儀LC-2030操作規程》

一、分析前準備

1.1 將流動相（色譜純級別的甲醇、乙腈或去離子水）經過0.45um的微孔濾膜過濾后，倒入流動相瓶中，放入超聲波清洗器內震蕩排氣20分鐘左右（注意將瓶蓋輕輕蓋上防灰）

1.2 將處理好的流動相放在儲液托盤上，將對應通道的洗液管路分別放入流動相瓶中，蓋好瓶蓋并記好對應通道的流動相種類。

1.3 將樣品處理稀釋后使用注射器過濾頭過濾后裝入1.5ml樣品瓶中（大約三分之二），放入自動進樣器的樣品架上，并記錄樣品瓶位置以便設置批處理文件。

1.4 打開柱溫箱門，將色譜柱的出口端安裝在色譜柱夾具上，在色譜柱上連接配管，在色譜柱出口端連接檢測器入口端的藍色PEEK管。

1.5 檢查清洗液，在RINSE通道內放置50%甲醇：水溶液；含有兩根管路的通道內放置10%異丙醇：水溶液。（清洗液建議至少一月更換一次）

二、分析

2.1 打開儀器左方的電源開關，待自檢完成后，使用觸屏筆輸入登錄通行ID Number （默認值為“00000”），按下OK進入初始窗口

2.2 雙擊桌面的LabSolutions圖標

在登錄菜單里，正確輸入用戶名和密碼（默認用戶名為“admin”，密碼不填），點擊確定，進入LabSolutions主項目

LabSolutions主項目包含4個子項目，“儀器”為在線采集項目；“處理工具”為離線處理數據項目；“管理工具”為軟件管理屬性設置項目；“手冊”為軟件在線使用手冊。

2.3 進入在線采集雙擊如下圖標，正常連接能聽到“滴”的連接提示音，如硬件不匹配提示，請參考附錄，重新做系統配置

2.4  進入數據采集界面后，看到以下畫面[img=,8,25]file:///C:/Users/陶振華/AppData/Local/Temp/ksohtml/wps8F23.tmp.png[/img]

2.5 選擇（新建或打開）方法文件

點擊主項目下【數據采集圖片如下】的進入數據采集項目，點擊工具欄中的新建或打開快捷鍵新建或者打開一個方法文件。

在“儀器參數”界面設置數據采集所需參數，主要包括：泵（模式：四元低壓梯度；流速；各通道流動相比例和壓力上限）；

檢測器波長、檢測池溫度；數據采集結束時間；柱溫箱溫度以及自動排氣等。（控制器與自動進樣器參數一般保持默認，如有梯度洗脫請參照說明書在“時間程序”內設置）

設置完成后，點擊“下載”并保存方法文件。

2.6 運行儀器

2.6.1 自動排氣：點擊工具欄內的“自動排氣”圖標按照方法內的設置進行自動排氣（一般針對當天使用的流動相通道，“RINSE”通道作為自動進樣器的洗針液必須保證每天排氣一次）

2.6.2 自動排氣完成后，泵會自動按照方法設定開始輸送流動相，柱溫箱開始控制溫度。請檢查儀器運行狀態，保證輸液泵、柱溫箱、檢測器運行正常。

2.6.3 自動排氣完成后，先輸送85%以上的甲醇（或乙腈）溶液沖洗管路20分鐘以上，再將流動相比例更換為數據采集需要的比例。（若流動相中含有緩沖鹽溶液，在更換至數據采集的比例前先使用10%的甲醇：水溶液過度30分鐘，詳細請查看“島津液相色譜流動相使用方法”一文）

2.6.4 觀察儀器的壓力線與檢測器信號線，待兩條線都平穩說明儀器的色譜條件穩定，可以進樣。

2.7 進樣

2.7.1 單次進樣：

點擊助手欄（或工具欄）內的“單次分析”圖標，在打開的對話框中設置數據文件的文件名以及保存路徑（DB軟件無需設置數據文件保存路徑）；

樣品名和樣品ID可根據需要填寫或不寫；

根據樣品瓶放置位置設置“樣品瓶”和“樣品瓶架”（如果需要運行空針，可將樣品瓶號設置為-1）；

設置“進樣體積”（LC-2030標準定量體積設定范圍是0.1-100uL）。設置完成后點擊“確定”開始單次分析。

2.7.2 批處理進樣：

點擊主項目里的“批處理分析”進入批處理分析項目界面，新建或打開一個批處理文件。點擊菜單欄內“編輯”下的“表簡單設置”彈出下面的對話框。

根據需要選擇“新建”或“添加”批處理表，檢查方法文件是否正確“一般會默認打開數據采集界面新建或打開的方法文件”；

根據樣品放置順序設置標準樣品與未知樣品的“樣品瓶號”、“樣品架號”、“進樣次數”、“進樣體積”并設置數據文件名，點擊確定生成批處理表。

確認各項參數無誤（如需修改可單擊對話框進行修改），保存批處理表，點擊助手欄內“批處理分析開始”。

若中途想修改批處理表，可點擊“暫停”圖標；若想終止批處理表，可點擊“停止”圖標。

2.8 沖洗系統

樣品分析完成后，用分析時的條件沖洗系統一段時間，確認柱子里不再有樣品。

分析使用緩沖鹽流動相作反相分析的，再用10%甲醇水沖洗系統30min，然后用甲醇沖洗系統30min以上。

若分析中沒有緩沖鹽流動相，直接用甲醇沖洗系統30min以上。（詳細請參照“島津液相色譜流動相使用說明”一文）。

2.9 關機

流路和色譜柱沖洗完成后，停止泵輸液與柱溫箱控溫，首先退出工作站，然后關閉儀器電源。

三、再解析

3.1 數據處理

單擊Labsolutions工作站的“處理工具”圖標后雙擊“再解析”圖標進入數據處理界面（或者在“數據采集”界面中單擊左側助手欄內“數據處理”圖標）

點擊助手欄右側數據管理器右上角的文件夾圖標打開數據文件保存路徑，雙擊數據文件名打開色譜圖（此時數據文件的內容就會顯示在“數據處理”窗口內）

單擊工具欄內“手動積分”圖標，彈出“手動積分欄”

可根據情況使用“手動積分欄”內的“去除峰”圖標刪除色譜圖內的雜質峰；觀察下方峰表內相應色譜峰的峰面積用于計算濃度。

3.2 報告

點擊左側助手欄內的“數據報告”圖標，即可生成當前圖譜的報告（單一譜圖的報告），可點擊工具欄內的“打印”圖標進行打印圖譜

若需要進行匯總報告，需先單擊左側助手欄內“向導”圖標完成5步向導后單擊主項目下“生成報告”圖標進入生成報告項目界面：在工具欄內使用“匯總每個化合物”在報告區域畫一塊表格并進行設置，后將色譜圖拖放至報告區域即可。（生成報告內的報告模板可進行保存以便下次使用）

3.3 校準曲線

請參照“Labsolutions標曲的建立”一文進行操作。