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HUVEC細胞,ATCC原代HUVEC細胞

來源:生物試劑銷售中心   2018年05月10日 13:13  

HUVEC細胞,ATCC原代HUVEC細胞

原代細胞培養成功以后,需要進行分離培養,否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養障礙,影響細胞生長。細胞由原培養瓶內分離稀釋后傳到新的培養瓶中培養的過程稱之為傳代培養。傳代細胞允許培養的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。

1. 操作步驟  張昕 

1)吸掉或倒掉培養瓶內舊培養液。

2)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養瓶底為宜。

3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化。

4)吸出消化液,向瓶內加入Hanks液少量,輕輕轉動培養瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養液,終止消化。

5)使用彎頭吸管,吸取瓶內培養液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞。

6)用計數板計數后,分別接種于新的培養瓶中,置CO2培養箱中進行培養。

7)細胞培養換液時間應根據細胞生長的狀態和實驗要求來確定。一般23d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續傳代擴大培養或換成維持液。

HUVEC細胞,ATCC原代HUVEC細胞2. 注意事項

1)掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導致細胞脫落、損傷。

2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應縮短,過低時細胞消化時間相對延長。

HUVEC細胞,ATCC原代HUVEC細胞相關現貨試劑,常備現貨:

V900271-500G

D2629

383112-100G

63138-250G

S5631

T2036-100MG

M1880-500G

C7698

14400-100MG

223506-25G

A2058

A7085-100G

223506-500G

P3932

K1512-500G

C7902-500G

219703

15972-5ML-F

C5080-500G

R7632

72609-100MG

21097-250G

12072

S3132-100MG

12022-1KG

G3632

C2932-5MG

C3306-100G

246171

L2378-10MG

71649-500G

G8270

I3377-5G

71650-1KG

C6762

C7397-1G

B6768-500G

*09713

471283-100ML

V900267-500G

15222

R0395-1MG

B7901-1KG

A7030

706329-1G

C1016-500G

L2630

74738-5ML

C4901-500G

D9515

471933-5g

V900266-500G

D2650

R8781-200UL

C5670-500G

D2650

S7276-25G

C5670-100G

D2650

N9125-10G

C1016-100G

D2650

483028-10G

S9638-25G

D2650

412805-100ML

S9638-500G

H26456

E14578-100G

71507-250G

D4540

V900415-25G

S9638-250G

71720

C0400-25MG

B1334-100G

208825

85450c

P6526-100G

134996

1430101

449830-5G

A6380

T8656-50G

298182-10G

C5138

77160-25G

900168-5G

F9037

G4382-250mg

554359-5G

K4894

52517-10ml

203602-50G

D5758

14265-2ML

211168-50G

I2393

72954-1ML-F

467901-50G

A5503

S5506-250G

76070-5G

D9542

A3381-25G

M1003-100G

156124

33742-100G

M1651-100G

50531

206075-1G

331058-100G

A6419

205796-2G

202908-10G

E7023

E9508-100ML

439800-5G

G4507

21479-1ML

105937-5G

S4641

R0901-100ML

459097-5G

G9268

119660-25G

A6014-10G

C9752

209465-25G

293733-5G

265357

F3510-100G

B4554-25G

T0303

R8004-5MG

258024-5G

M4125

32417-500MG

T3251-25G

S5390

S8875-500G

A2056-1MG

81242

B4501-100MG

HUVEC細胞,ATCC原代HUVEC細胞復蘇細胞:

1)從罐中取出凍存管。

2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,3060s內完成。

3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養液。

4)低速離心(5001000rmin) 5min,去上清后再用培養液洗一次。

5)用培養液適當稀釋后,裝入培養瓶37℃培養,次日更換一次培養液后,繼續培養。以后仍按常規進行培養。

凍存細胞數量要充分,密度應達到107ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×105ml數量。

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