紫外分光光度法檢測桔皮中總黃酮含量的方法研究
柑橘是蕓香科柑橘屬植物的成熟果實,其干燥果皮是藥材陳皮,具有理氣健脾、燥濕化痰作用。柑橘在我國由非常豐富的資源,新鮮柑橘皮中含有豐富的黃銅類物質成分,藥理學研究表明黃銅成分是極有效的活性成分,其有抗炎、抗氧化、抗過敏作用以及降低血液和肝臟中膽固醇的作用。黃酮類化合物的定量方法常用的有FPLC法和分光光度法。在實際生產和科研過程中,考慮到方法的簡便、快捷及可行性,對總黃酮含量的測定,多采用NaNO?-AI(NO?)?-NaOH體系分光光度法,在510nm下測定其吸光度。由于天然植物的組成非常復雜,各種黃銅類物質性質也存在差別,并且由于黃銅類化合物提取液中各種雜質的存在,如含有的脂溶性色素和芳香油,使顯色法測定總黃酮時產生混濁現象,造成很大誤差。這就使分光光度法在實際測定過程中產生一些問題,影響結果的準確性。由于大多數黃酮類化合物分子中存在肉桂酰基和苯甲酰基組成的交叉共軛體系,其MeOH譜200nm-400nm的區域內存在兩個主要的紫外吸收帶。紫外分光光度法依據黃銅自身結構的特點,不使用顯色劑,直接在其特征吸收峰處對公試樣進行測定。相比較紫外分光光度法而言,510nm可見光顯色法需要的試劑種類多,每一種試劑加入后需要一段反應時間,等待時間長,操作步驟繁瑣。本文通過用紫外分光光度法測定各種黃酮類化合物提取液中的總黃酮含量,為提取工藝的優化提供實驗依據。
儀器準備
UV1700系列 紫外可見分光光度計
UV1700PC UV Visible Spectrophotometer
簡介 : 本產品采用全新設計的比例監測雙光束學系統,具有優良的光學性能,使用方便,是實驗室分析*的基本儀器之一。
應用領域: 各種涉及水和廢水分析領域的通用儀器,應用范圍包括市政和工業廢水、飲用水、加工過程用水、地表水、冷卻水和鍋爐補給水等。
樣品處理:自制桔皮,品種為浙江紅橘
實驗方法:
1.510nm可見分光光度法
- 對照品溶液的制備
- 標準曲線的制作
- 310nm紫外分光光度法
- 吸收波長的選擇
測定結果:
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