PASMCS細胞株復蘇失敗原因分析

產品名稱：PASMCS細胞

中文名稱：大鼠肺動脈平滑肌細胞

種屬：大鼠

來源：肺動脈平滑肌細胞

培養條件：DMEM

生長狀態：貼壁

生物試劑銷售中心細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

注意事項如下：

1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們。

2 對于貼壁細胞，若細胞漂浮：培養瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養箱內。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉；如細胞還不貼壁，將細胞離心收集移到新的培養瓶中，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和本公司技術部溝通交流。

PASMCS細胞株復蘇失敗原因分析

細胞培養的一般過程

一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。

二、取材 在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定），經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）后接入培養器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的培養稱為原代培養。

理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用于培養，實際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個體的組織容易培養，分化程度低的組織比分化高的容易培養，腫瘤組織比正常組織容易培養。取材后應立即處理，盡快培養，因故不能馬上培養時，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養液中保存。取組織時應嚴格保持無菌，同時也要避免接觸其他的有害物質。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。

三、培養 將取得的組織細胞接入培養瓶或培養板中的過程稱為培養。如系組織塊培養，則直接將組織塊接入培養器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再加入培養基。如系細胞培養，一般應在接入培養器皿之前進行細胞計數，按要求以一定的量（以每毫升細胞數表示）接入培養器皿并直接加入培養基。細胞進入培養器皿后，立即放入培養箱中，使細胞盡早進入生長狀態。

PASMCS細胞株復蘇失敗原因分析

bEnd.3      小鼠腦微血管內皮細胞         小鼠         腦微血管；內皮細胞；BALB/c     DMEM     貼壁

C4-2 人前列腺癌細胞     人     前列腺癌；左鎖骨上淋巴結轉移；男性     1640         貼壁

C4-2B       人前列腺癌細胞     人     前列腺癌；左鎖骨上淋巴結轉移；男性     F12K          貼壁

DOK 人口腔黏膜癌前病變細胞     人     口腔異常增生；男性     1640         貼壁

SCC-15     人舌磷癌細胞         人     舌鱗癌；男性         EMEM      貼壁

DT40         雞淋巴瘤細胞         雞     淋巴瘤； Hy-Line SC      1640         懸浮

RBE4         大鼠腦血管內皮細胞   大鼠         2型腺病毒轉化；SD大鼠     1640         貼壁

SCC-090   人口腔鱗癌細胞     人     舌鱗癌細胞；男性         McCoy’s    貼壁

SCC-9        人舌鱗癌細胞        人     舌鱗癌細胞；男性         EMEM      貼壁

SCC-4        人舌鱗癌細胞         人     舌鱗癌細胞；男性         EMEM      貼壁

SCC-25     人舌鱗癌細胞         人     舌鱗癌細胞；男性         EMEM      貼壁

THLE-2     SV40轉化人肝上皮細胞        人     肝上皮細胞；SV40轉化；男性    1640         貼壁

THLE-3     SV40轉化人肝上皮細胞        人     肝上皮細胞；SV40轉化        1640         貼壁

CAL-51     人乳腺癌細胞         人     乳腺癌；胸腔積液轉移；女性     DMEM     貼壁

CAL-148   人乳腺癌細胞         人     乳腺癌；胸腔積液轉移；女性     EMEM      貼壁

ZYM-DIEC02    豬小腸上皮細胞     豬     小腸上皮細胞         1640         貼壁

G422         小鼠腦神經膠質母細胞         小鼠         腦神經膠質母細胞         DMEM     貼壁

BMSC/hBMSCs         人骨髓間充質干細胞     人     骨髓間充質干細胞         DMEM     貼壁

VCaP         人前列腺癌細胞     人     前列腺癌；男性     DMEM     貼壁

VX2  兔間變表皮鱗癌瘤株     兔     表皮鱗癌         EMEM      貼壁

CF-1MEF  小鼠胚胎成纖維細胞     小鼠         胚胎；成纖維細胞；CF-1      DMEM     貼壁

AR42J       大鼠胰腺外分泌細胞     大鼠         胰腺外分泌細胞；Wistar      DMEM     貼壁

PMVEC     大鼠肺微血管內皮細胞         人     肺微血管；內皮細胞     DMEM     貼壁

RGM-1     正常胃粘膜上皮細胞     大鼠         胃黏膜；上皮細胞；Wistar F12   貼壁

KMS11      人多發性骨髓瘤細胞     人     多發性骨髓瘤         IMDM      懸浮

KMS26      人多發性骨髓瘤細胞     人     多發性骨髓瘤         IMDM      懸浮

SKM-1       人骨髓增生異常綜合征細胞         人     骨髓增生異常綜合征     IMDM      懸浮

HPBALL    人T淋巴細胞白血病細胞     人     T淋巴細胞白血病細胞 1640         懸浮

BJAB         人Burkitt's淋巴瘤細胞 人     Burkitt's淋巴瘤      1640         懸浮

GES-1        人胃粘膜細胞         人     胃粘膜；SV40轉化        1640         貼壁

Toledo      人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞         人     彌漫大B細胞淋巴瘤；女性         IMDM      懸浮

9L     大鼠膠質瘤細胞     大鼠         膠質瘤；Fischer 344      DMEM     貼壁

MLE-12    小鼠肺上皮細胞     小鼠         肺；上皮細胞；SV40轉化；FVB/N      DMEM     貼壁

KBM5       人慢性髓白血病細胞     人     慢性髓白血病；女性     IMDM      懸浮

VSC4.1     脊髓前角運動神經元瘤細胞系     人     神經元瘤         DMEM     貼壁

HIC  人小腸癌細胞系     人     小腸癌     1640         貼壁

LN-18        人神經膠質瘤細胞         人     膠質瘤；男性         DMEM     貼壁

Kupffer     肝枯否細胞                       1640或DMDM       貼壁

SNU475    人肝癌細胞     人     肝癌；男性     1640         貼壁

T98G         人腦膠質細胞瘤細胞     人     膠質瘤；男性         DMEM     貼壁

HMEC-1   人微血管內皮細胞株     人     微血管；內皮細胞；SV40轉化；男性        1640         貼壁

NCTC1469        小鼠正常肝細胞     小鼠         肝；自發永生；C3H/An         DMEM     貼壁

HIEC         正常人腸上皮細胞         人     腸；上皮細胞         1640         貼壁

HPDE6-C7(H6C7)     人正常胰腺導管上皮細胞     人     胰腺導管；上皮細胞；HPV16轉化；女性          DMEM     貼壁

RGC-5       小鼠視網膜神經節細胞         小鼠         視網膜神經節細胞         DMEM     貼壁

hRMECs   人視網膜微血管內皮細胞     人     視網膜微血管；內皮細胞     DMEM     貼壁

MN9D      小鼠中腦多巴胺能神經元細胞     小鼠         多巴胺能神經元細胞     EMEM      貼壁

HCS-2/8     人軟骨肉瘤細胞     人     軟骨肉瘤；男性     McCoy’s    貼壁

RTE  大鼠氣管上皮細胞         大鼠         氣管；上皮細胞     DMEM     貼壁

為了應付季節變化CV-1細胞運輸、培養帶來的真菌等污染問題，公司特做以下建議：

1）細胞的運輸、轉移過程中，請勿打開自封袋；拿放細胞時請持瓶體，切勿在非無菌環球中碰觸、擰動瓶口封口膜位置

2）進入生物安全柜前，打開自封袋拿出培養瓶，噴上酒精放進操作臺（不建議使用酒精棉球擦拭），撕開封口膜后，用酒精燈外焰對瓶口燒灼一圈（3秒左右）

3）豎立培養瓶，擰開瓶蓋（如是貼壁細胞，請用真空泵或吸管移除原配培養基，切勿讓瓶口處的液體回流進瓶內）

4）更換為含10%-20%血清的*培養基，嚴格按照無菌操作要求繼續培養

PASMCS細胞株復蘇失敗原因分析