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CA9-22細胞株復(fù)蘇失敗原因分析

來源:生物試劑銷售中心   2017年03月23日 14:05  

CA9-22細胞株復(fù)蘇失敗原因分析

產(chǎn)品名稱:CA9-22細胞

中文名稱:人口腔上皮癌細胞

種屬:人

來源:牙齦鱗癌;男性

培養(yǎng)條件:DMEM

生長狀態(tài):貼壁

生物試劑銷售中心細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

注意事項如下:

1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。

2 對于貼壁細胞,若細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和本公司技術(shù)部溝通交流。

CA9-22細胞株復(fù)蘇失敗原因分析

細胞培養(yǎng)的一般過程

一、準備工作 準備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進行。準備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。

二、取材 在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。

理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時應(yīng)嚴格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。

三、培養(yǎng) 將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基。如系細胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細胞進入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細胞盡早進入生長狀態(tài)。

CA9-22細胞株復(fù)蘇失敗原因分析

bEnd.3      小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞         小鼠         腦微血管;內(nèi)皮細胞;BALB/c     DMEM     貼壁

C4-2 人前列腺癌細胞          前列腺癌;左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性     1640         貼壁

C4-2B       人前列腺癌細胞          前列腺癌;左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;男性     F12K          貼壁

DOK 人口腔黏膜癌前病變細胞          口腔異常增生;男性     1640         貼壁

SCC-15     人舌磷癌細胞              舌鱗癌;男性         EMEM      貼壁

DT40         雞淋巴瘤細胞              淋巴瘤; Hy-Line SC      1640         懸浮

RBE4         大鼠腦血管內(nèi)皮細胞   大鼠         2型腺病毒轉(zhuǎn)化;SD大鼠     1640         貼壁

SCC-090   人口腔鱗癌細胞          舌鱗癌細胞;男性         McCoys    貼壁

SCC-9        人舌鱗癌細胞             舌鱗癌細胞;男性         EMEM      貼壁

SCC-4        人舌鱗癌細胞              舌鱗癌細胞;男性         EMEM      貼壁

SCC-25     人舌鱗癌細胞              舌鱗癌細胞;男性         EMEM      貼壁

THLE-2     SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細胞             肝上皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化;男性    1640         貼壁

THLE-3     SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細胞             肝上皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化        1640         貼壁

CAL-51     人乳腺癌細胞              乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性     DMEM     貼壁

CAL-148   人乳腺癌細胞              乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性     EMEM      貼壁

ZYM-DIEC02    豬小腸上皮細胞          小腸上皮細胞         1640         貼壁

G422         小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞         小鼠         腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞         DMEM     貼壁

BMSC/hBMSCs         人骨髓間充質(zhì)干細胞          骨髓間充質(zhì)干細胞         DMEM     貼壁

VCaP         人前列腺癌細胞          前列腺癌;男性     DMEM     貼壁

VX2  兔間變表皮鱗癌瘤株          表皮鱗癌         EMEM      貼壁

CF-1MEF  小鼠胚胎成纖維細胞     小鼠         胚胎;成纖維細胞;CF-1      DMEM     貼壁

AR42J       大鼠胰腺外分泌細胞     大鼠         胰腺外分泌細胞;Wistar      DMEM     貼壁

PMVEC     大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞              肺微血管;內(nèi)皮細胞     DMEM     貼壁

RGM-1     正常胃粘膜上皮細胞     大鼠         胃黏膜;上皮細胞;Wistar F12   貼壁

KMS11      人多發(fā)性骨髓瘤細胞          多發(fā)性骨髓瘤         IMDM      懸浮

KMS26      人多發(fā)性骨髓瘤細胞          多發(fā)性骨髓瘤         IMDM      懸浮

SKM-1       人骨髓增生異常綜合征細胞              骨髓增生異常綜合征     IMDM      懸浮

HPBALL    T淋巴細胞白血病細胞          T淋巴細胞白血病細胞 1640         懸浮

BJAB         Burkitt's淋巴瘤細胞      Burkitt's淋巴瘤      1640         懸浮

GES-1        人胃粘膜細胞              胃粘膜;SV40轉(zhuǎn)化        1640         貼壁

Toledo      人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞              彌漫大B細胞淋巴瘤;女性         IMDM      懸浮

9L     大鼠膠質(zhì)瘤細胞     大鼠         膠質(zhì)瘤;Fischer 344      DMEM     貼壁

MLE-12    小鼠肺上皮細胞     小鼠         肺;上皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化;FVB/N      DMEM     貼壁

KBM5       人慢性髓白血病細胞          慢性髓白血病;女性     IMDM      懸浮

VSC4.1     脊髓前角運動神經(jīng)元瘤細胞系          神經(jīng)元瘤         DMEM     貼壁

HIC  人小腸癌細胞系          小腸癌     1640         貼壁

LN-18        人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞              膠質(zhì)瘤;男性         DMEM     貼壁

Kupffer     肝枯否細胞                       1640DMDM       貼壁

SNU475    人肝癌細胞          肝癌;男性     1640         貼壁

T98G         人腦膠質(zhì)細胞瘤細胞          膠質(zhì)瘤;男性         DMEM     貼壁

HMEC-1   人微血管內(nèi)皮細胞株          微血管;內(nèi)皮細胞;SV40轉(zhuǎn)化;男性        1640         貼壁

NCTC1469        小鼠正常肝細胞     小鼠         肝;自發(fā)永生;C3H/An         DMEM     貼壁

HIEC         正常人腸上皮細胞              腸;上皮細胞         1640         貼壁

HPDE6-C7(H6C7)     人正常胰腺導(dǎo)管上皮細胞          胰腺導(dǎo)管;上皮細胞;HPV16轉(zhuǎn)化;女性          DMEM     貼壁

RGC-5       小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞         小鼠         視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞         DMEM     貼壁

hRMECs   人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞          視網(wǎng)膜微血管;內(nèi)皮細胞     DMEM     貼壁

MN9D      小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞     小鼠         多巴胺能神經(jīng)元細胞     EMEM      貼壁

HCS-2/8     人軟骨肉瘤細胞          軟骨肉瘤;男性     McCoys    貼壁

RTE  大鼠氣管上皮細胞         大鼠         氣管;上皮細胞     DMEM     貼壁

為了應(yīng)付季節(jié)變化CV-1細胞運輸、培養(yǎng)帶來的真菌等污染問題,公司特做以下建議:

1)細胞的運輸、轉(zhuǎn)移過程中,請勿打開自封袋;拿放細胞時請持瓶體,切勿在非無菌環(huán)球中碰觸、擰動瓶口封口膜位置

2)進入生物安全柜前,打開自封袋拿出培養(yǎng)瓶,噴上酒精放進操作臺(不建議使用酒精棉球擦拭),撕開封口膜后,用酒精燈外焰對瓶口燒灼一圈(3秒左右)

3)豎立培養(yǎng)瓶,擰開瓶蓋(如是貼壁細胞,請用真空泵或吸管移除原配培養(yǎng)基,切勿讓瓶口處的液體回流進瓶內(nèi))

4)更換為含10%-20%血清的*培養(yǎng)基,嚴格按照無菌操作要求繼續(xù)培養(yǎng)

CA9-22細胞株復(fù)蘇失敗原因分析

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