1.ATCC菌種塑料袋的選擇不同
常壓蒸汽滅菌一般選用聚乙烯薄膜,而高壓蒸汽滅菌應(yīng)選用聚丙烯薄膜,厚度為5~6絲,過(guò)薄,耐壓和耐熱能力低,會(huì)影響成品率。聚乙烯薄膜不耐高壓,在1.2公斤/平方厘米高壓下會(huì)融化,不能使用。
2.消毒壓力和溫度不能過(guò)高
高壓蒸汽消毒壓力比較高,但由于培養(yǎng)基包裝大多使用塑料薄膜,消毒壓力不能超過(guò)1.4公斤/平方厘米,可以通過(guò)延長(zhǎng)消毒時(shí)間至2小時(shí)左右來(lái)達(dá)到消毒效果。消毒壓力和溫度過(guò)高,薄膜會(huì)出現(xiàn)融化或膨脹,產(chǎn)生裂縫、小洞,接種后易感染雜菌。
3.消毒時(shí)間應(yīng)隨培養(yǎng)基質(zhì)不同而不同
一般而言,顆粒大的消毒時(shí)間長(zhǎng),麥粒、玉米作為基質(zhì)時(shí)的消毒時(shí)應(yīng)該長(zhǎng)于木屑。
4.ATCC菌種加壓過(guò)程中應(yīng)先放盡鍋內(nèi)冷氣
由于高壓鍋加熱初始鍋內(nèi)存有冷空氣,開(kāi)始加熱后,熱蒸汽集聚在鍋的上部,越聚越多,壓力越來(lái)越高,冷空氣卻還集聚底部,這時(shí)壓力表上顯示的壓力是虛假的,只有把底部的冷空氣放掉,顯示的才是真實(shí)的壓力。方法是加熱后,當(dāng)壓力表壓力達(dá)到0.5公斤/平方厘米時(shí),打開(kāi)放氣閥,放盡空氣,再加熱滅菌。如能放二次空氣,效果會(huì)更好。
5.加熱升溫和放氣減壓要慢
塑料袋的薄膜是軟性的,高壓鍋加熱和減壓過(guò)程中塑料袋內(nèi)外存有壓力差,加熱或減壓過(guò)快,內(nèi)外壓力差異就大,容易引起塑料袋變形或脹袋、裂縫,接種后易感染雜菌。
6.其他
另外,ATCC菌種在菌種袋外套一牛皮紙袋(可以反復(fù)利用),可以減少因裝袋、搬運(yùn)、接種過(guò)程中硬物碰撞造成的塑料袋破損。由于各個(gè)廠的滅菌鍋,其質(zhì)量、結(jié)構(gòu)、容量不同,塑料袋的均勻度、培養(yǎng)料的顆粒、質(zhì)地不一樣,加上工作人員操作技術(shù)不同,在大面積應(yīng)用時(shí)應(yīng)反復(fù)比較試驗(yàn),選出一個(gè)*方案后再應(yīng)用。
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