液相色譜儀的品牌、種類很多，各家的使用方法也不盡一樣，主要看你是那一款的液相色譜儀，當初購買設備時，廠家的工程師會培訓使用方法。液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展很快如在環境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發烴類，使環境污染分析得到新的發展。

　　液相色譜儀的使用方法：

　　內容：

　　1 開機

　　1.1 打開電腦。

　　1.2 打開液相色譜各個模塊的電源。

　　1.3 雙擊桌面“儀器—聯機"，進入聯機界面。

　　1.4 排氣：

　　1.4.1 手動旋開泵處沖洗閥。

　　1.4.2 右鍵單擊“泵"圖標區域，選擇“方法?"選項，進入泵編輯畫面，設流速：5ml/min，點擊“確定"。

　　1.4.3 右鍵單擊“泵" 圖標，點擊“控制?"選項，選中“ON"，點擊“確定"，則系統開始沖洗，直到管線內無氣泡為止，，切換通道繼續沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止。

　　1.4.4 右鍵單擊“泵" 圖標，點擊“方法?"選項，設流速：0ml/min，手動旋緊沖洗閥。

　　1.4.5 右鍵單擊“泵"圖標，點擊“方法?"選項，按照方法要求選擇合適比例的流動相，設流速：1.0ml/min。

　　1.4.6 同理右鍵單擊“柱溫箱"，“檢測器"圖標，點擊“方法?"選項，按照方法的要求設置溫度，波長，點擊“控制" 選項，“ON"打開柱溫箱和檢測器。

　　2 編輯方法

　　2.1 點擊“方法"-“編輯完整方法"開始編輯完整方法。

　　2.2 選中除“數據分析 "外的三項，進入下一選項卡。

　　2.3 方法信息：在“方法注釋"中加入方法的信息。進入下一選項卡。

　　2.4 泵參數設定：在“流速"處輸入流量， 如1.0ml/min，停止時間：如10 min，按照要求選擇合適比例的流動相配比，如乙腈：水=75：25，A為水，B為乙腈，則設置B：75%即可。進入下一選項卡。

　　2.5 自動進樣器參數設定： 選擇“洗針進樣"----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，進入下一選項卡。

　　2.6 柱溫箱參數設定： 在“溫度"下面的空白方框內輸入所需溫度，如：40度。進入下一選項卡。

　　2.7 UV檢測器參數設定： 在“波長"下方的空白處輸入所需的檢測波長，如254nm。點擊確定。

　　2.8 在“ 運行時選項表 "中，選中“ 數據采集"，點擊“確定"。

　　2.9 從“方法"菜單，選中“方法另存為?"，輸入一方法名，如“測試"，點擊“確定。

　　3 單次采集

　　3.1 從“運行控制"菜單中，選擇“樣品信息"選項，選擇合適的路徑，在“數據文件"中選擇 “前綴/計數器"，輸入樣品瓶的位置，點擊“確定"。

　　3.2 基線平穩后約10分鐘，從“運行控制"菜單中選擇“運行方法"。

　　4 多次數據采集

　　4.1 按照步驟2 編輯完整方法。

　　4.2 點擊“序列"-“序列表"，輸入“樣品瓶"“樣品名稱"，“進樣次數"，選擇合適的“做樣方法"

　　4.3 點擊“序列"-“序列參數"，選擇序列數據的保存路徑，數據建議以選擇 “前綴/計數器"保存。

　　4.4 從“序列"菜單，選中“序列另存為?"，輸入一序列名，如“測試"，點擊“確定。

　　4.5 從“運行控制"菜單中選擇“運行序列"。

　　5 數據分析

　　5.1 雙擊“儀器 —脫機"圖標 進入的脫機畫面。

　　5.2 從“視圖"菜單中，點擊“數據分析"進入數據分析畫面。

　　5.3 從“文件"菜單選擇“調用信號"，選中您的數據文件名。點擊“ 確定"，則數據被調出。

　　5.4 做譜圖優化：從“圖形"菜單中選擇“信號選項"。從“范圍" 中選擇“滿量程" 或“自動量程" 及合適的時間范圍或選擇“自定義量程" 調整。反復進行，直到圖的比例合適為止。點擊“ 確定"。

　　6 積分：

　　6.1 從“積分"菜單中選擇“積分事件"選項，選擇合適的“斜率靈敏度"，“峰寬"，“zui小峰面積"，“zui小峰高"。點擊 ，自動加載積分參數。

　　6.2 點擊左邊“√"圖標，將積分參數存入方法并退出“積分事件"。

　　6.3 如積分結果不理想，則修改相應的積分參數，直到滿意為止。

　　7 標準曲線

　　7.1 點擊“校正"-“校正設置"，輸入“含量單位"。

　　7.2 點擊“校正"-“新建校正表"，點擊確定。輸入“化合物名稱"和“含量"，點擊“確定"，按照提示刪除其他組分。

　　7.3 至此完成單級校正，如要增加校正級別，應從“文件"菜單選擇“調用信號"，選中您的數據文件名，點擊“校正"-“添加級別"，點擊確定，輸入“含量"，依次增加校正級別。

　　8 打印報告

　　8.1 從“報告"菜單中選擇“設定報告"選項，點擊“定量結果"框中“定量"右側的黑三角，選中“外標法"，其它選項不變，點擊“ 確定"。

　　8.2 從“報告"菜單中選擇“打印報告"，則報告結果將打印到屏幕上，如想輸出到打印機上，則點擊“報告" 底部的“打印"鈕。

　　8.3 點擊“文件"-“另存為"-“方法"，把數據分析方法保存，下次分析可直接在“文件"-“調用"-“方法"下，將該方法調出使用。

　　9 關機

　　9.1 關機前，先關紫外燈，用相應的溶劑充分沖洗系統大約30分鐘。

　　9.2 退出化學工作站，依提示關泵，及其它窗口，關閉計算機。

　　9.3 關閉Agilent 1260各模塊電源開關。

　　10 其它注意事項

　　10.1 當樣品運行時，切勿打開自動進樣器前遮蓋，否則進樣過程停止。

　　10.2 系統發生漏液時，機器會檢測到并停止進樣，狀態指示燈為紅色。檢查擦干并安置好漏液處，擦干漏液傳感器，單擊ON按鈕，系統重新初始化。

　　10.3 注意紫外燈使用壽命，切勿來回開關紫外燈。

　　液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。