DH5α感受態細胞

操作方法：（以下操作均按無菌條件的標準進行）

1. 將感受態細胞置于冰上融化，以下實驗以 100μl 感受態細胞為例。
2. 向感受態細胞懸液中加入需轉化的目的 DNA，注意目的 DNA 的體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一，輕輕旋轉離心管以混勻內容物，冰浴放置 30 分鐘。
3. 將離心管置于 42℃水浴中熱擊60-90秒，然后快速轉移到冰浴中放置 2-3 分鐘，注意不要搖動離心管。
4. 向離心管中加入 900μl 無菌無抗的 SOC 或 LB 培養基，37℃ 180 rpm 振蕩培養 30分鐘到1小時。目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達，使菌體復蘇。
5. 取適量已轉化的感受態細胞涂布含相應抗生素的 SOC 或 LB 平板，37℃倒置培養 12-16小時或隔夜培養。涂布用量可根據具體實驗來調整，如轉化的 DNA 總量較多，可取200μl 左右的轉化產物涂板；反之，如轉化的 DNA 總量較少，可4℃，2500g離心5min后，棄去上清約700μl，用剩余約200-300μl 的轉化產物涂板。過多菌液可以抑制細菌生長。

DH5α感受態細胞特 點:  一種用于鋪制與培養質粒平板和粘粒平板的重組缺陷的抑制型菌株。其 φ80 lacZ△M15 基因的產物可與 pUC 載體編碼的 β-半乳糖苷酶氨基端實現 β 互補，可用于藍白斑篩選。

注：內容供參考，具體產品信息請來電或在線咨詢。