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凱氏定氮儀及消化過程中的注意事項
閱讀：757 發(fā)布時間：2023-7-25
蛋白質(zhì)是人體細胞中必要的組成部分，因此人類對于食物中蛋白質(zhì)的攝取是非常重要的，關(guān)系到人類的生命活動。那么換句話來說，測定食物中蛋白質(zhì)的含量，也是尤為必要的一件事情，隨著儀器產(chǎn)品的發(fā)展，現(xiàn)在我們在進行蛋白質(zhì)測定的時候都是采用專業(yè)的凱氏定氮儀。經(jīng)過多次的試驗表明，凱氏定氮儀能夠避開手工方法的缺點，其測定結(jié)果符合國際標準，而且測量速度快、穩(wěn)定，因此是值得推薦的檢測蛋白質(zhì)含量的設備。
但還需要注意的是蛋白檢測的前處理消化步驟也很關(guān)鍵，這就需要用到智能消化爐，所以為了保證測定結(jié)果的準確性，在使用定氮儀測定蛋白質(zhì)含量的時候，有以下幾個方面需要注意：
1.消化時間要掌握好，時間過長會引起氨的損失；消化時間不夠，消化不完全也會導致總氮量偏低。一般保險起見，從文火開始消化到420℃保溫，需要2h左右的時間。
2.樣品放入消化管內(nèi)時，不要沾附頸上，若沾附時可用少量水沖下，以免被檢樣消化不完全，結(jié)果偏低。
3.硫酸鉀與硫酸用量的比值是消化成功的關(guān)鍵，它決定酸的沸點，也決定消化所需的時間。添加硫酸鉀可以提高溫度加快有機物分解，但硫酸鉀量過大，沸點太高，生成的硫酸氫銨就分解放出氨，使氮損失。因此當硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時，要增加硫酸的量。
4.消化時，若樣品含糖高或含脂較多時，注意控制加熱溫度，可加入少量正辛醇或液體石蠟，或消泡劑減少泡沫產(chǎn)生。
5.消化時若樣品不易消化至澄清透明，可將消化管中溶液冷卻，加入數(shù)滴過氧化氫后，再繼續(xù)加熱消化至完全。
6.定氮儀使用前可先空蒸一段時間，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，減少誤差。
7.消化時熱源的強度同迅速消化和完全氨化關(guān)系很大，在整個消化過程中，不要直接用強火，保持和緩的沸騰，以文火慢慢升溫，以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無硫酸存在的情況下，使氮有損失。
8.將消化后的樣品管放入蒸餾室時，為避免蒸餾過程中溶液沸騰時溢出造成氨損失，在將消化管至密封圈時用手輕旋一下消化管，使與密封圈接觸更加密閉。
9.定氮儀加堿管路使用前要用氫氧化鈉溶液沖洗，使用后要及時用蒸餾水反復沖洗，不能長期積有堿液，以免放置后管路堵塞。
對于還是使用凱氏定氮儀的企業(yè)而言，以上的注意事項還是很有參考價值的。