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天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司

進口液相色譜儀一般情況下的使用技巧

時間:2018-3-1 閱讀:727
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   造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染,或柱頭填料塌陷導(dǎo)致的。
  進口液相色譜儀對于*種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。
  對于第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復(fù)幾次,直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。
  對進口液相色譜儀的要求
  1.流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細(xì)的膜過濾)。
  2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
  3.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進液。
  4.使用緩沖溶液時,做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
  5.長時間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
  6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
  7.C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
  8.堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
  ①以異丙醇作溶劑沖洗;
  ②放在異丙醇中間用超聲波清洗;
  ③用10%稀硝酸清洗;
  9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
  10.如果進液管內(nèi)不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
  11.進口液相色譜儀要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
  12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

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