大鼠白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒準備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃ ）保存，避免反復凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1200ng/ml的溶液。設標準管8管，管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul 。在管中加入1200ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。
3. 10×標本稀釋液用蒸餾水作1：10倍稀釋（示例：1ml濃稀液+9ml蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水1：20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）。

實驗流程:
1. 產品僅用于科研實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數。
檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul ，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液100ul 。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置37℃30分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置37℃暗處反應15分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10．如與英文說明書有異，產品僅用于科研以英文說明書為準。
注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。