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什么是賽默飛 微孔板熒光檢測儀

2025-6-7  閱讀(86)

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Thermo Fisher Scientific(賽默飛)Fluoroskan 微孔板熒光檢測儀(貨號:5200450)的詳細介紹,圍繞其結構原理、核心參數、操作界面、應用案例、功能擴展與技術支持六大部分展開,全面呈現其在熒光定量分析中的應用能力。文章嚴格避開廣告性描述,著重還原其科學屬性與實際性能。


一、產品概覽

Fluoroskan 是賽默飛推出的一款微孔板熒光檢測設備,型號為 5200450,專門用于測定樣品的熒光強度。它配備穩定的光源系統和高靈敏度檢測模塊,能夠適配96孔和384孔微孔板,支持熒光相關實驗如:

  • 核酸定量(如RNA/DNA濃度檢測)

  • 熒光標記蛋白分析

  • 細胞活性/毒性實驗(如FDA、Calcein AM染料法)

  • 酶聯熒光免疫分析(ELFIA)

  • 報告基因檢測(如GFP、Luciferase)

Fluoroskan 的設計目標是為實驗室提供一種可靠、結構緊湊的熒光定量解決方案,適用于分子生物學、生物化學、細胞學等研究領域。


二、技術結構與檢測原理

Fluoroskan 采用基于濾光片的光路系統,結合高性能的光電倍增管(PMT)進行檢測,其基本檢測流程包括:

  1. 激發光源照射樣品:選定波長范圍的激發光通過濾光片投射至樣本中。

  2. 熒光激發與發射:目標分子受激發后發出特定波長的熒光。

  3. 發射光收集:通過發射濾光片進行波長分離,排除雜散光。

  4. 光信號轉換:PMT對熒光信號進行采集并轉化為電信號,經過處理后輸出讀數。

濾光片式系統相比單色器系統響應速度更快,特別適用于多樣本、高重復率的檢測流程。


三、核心參數與配置說明

以下是 Fluoroskan 5200450 的關鍵性能參數,便于實驗設計參考:

參數類別數值或說明
檢測方式熒光強度(Fluorescence Intensity)
樣本容器96孔和384孔微孔板
激發/發射濾光片槽位各6個,可自由組合
檢測靈敏度DNA檢測至<1 pg/well(依據染料與孔型)
光源類型高強度氙燈
動態范圍>6個數量級
讀取速度96孔全板小于20秒
溫控模塊可選,環境至45°C,適用于溫控反應
搖板功能支持三種模式:線性、軌道、雙向(時間與速率可調)
軟件支持配套 SkanIt 軟件,支持多用戶管理與方法庫建設
接口方式USB 2.0,兼容Windows平臺

儀器采用模塊化結構,可根據研究方向配置不同波長濾光片(如485/530 nm、355/460 nm等)以適應不同熒光染料。


四、操作系統與數據輸出

Fluoroskan 搭配 Thermo Fisher 自研的 SkanIt 軟件系統,用于實驗編程、運行監控和數據處理,具有以下特點:

1. 可視化方法編輯

  • 拖拽式模塊操作,可實現激發-讀取-搖板-延時等動作的組合

  • 支持預設或自定義實驗模板,如熒光標準曲線、動力學曲線等

2. 實時數據監控

  • 實驗過程中可觀察各孔熒光變化,支持動態刷新

  • 可生成熱圖、柱狀圖、熒光衰減曲線等多種可視化形式

3. 數據導出與統計分析

  • 支持輸出為Excel、CSV、PDF等格式

  • 可自動進行平均值、標準差、背景扣除、回歸分析等基礎處理

4. 用戶權限管理

  • 支持多用戶登錄與方法加密,符合部分實驗室質量體系要求


五、典型應用場景

Fluoroskan 適配多種常見熒光實驗流程,以下列舉幾類代表性應用:

1. 熒光染料定量核酸分析

如使用 PicoGreen 染料進行 DNA 定量時,Fluoroskan 可在較低樣本濃度下獲得清晰信號,并通過軟件自動擬合標準曲線,輸出精確濃度數值。

2. 蛋白質標記檢測

在抗體或小分子標記熒光素(如FITC、Alexa Fluor)后,Fluoroskan 可用于分析其結合強度或動力學過程,適用于ELISA替代或蛋白-配體相互作用研究。

3. 細胞活力與毒性評價

在細胞實驗中,常用如Calcein AM染料檢測活細胞熒光,或使用ROS熒光探針檢測細胞應激反應。Fluoroskan 提供足夠時間分辨率進行短時動力學記錄。

4. 信號通路與基因報告系統研究

配合熒光報告基因如GFP、Luciferase等,Fluoroskan 支持時間點采樣或連續監控,適合用于藥物篩選、高通量通量測試平臺等場景。


六、功能擴展與配套資源

為了滿足不同實驗需求,Fluoroskan 提供以下擴展功能與服務:

1. 濾光片定制

用戶可根據實驗染料波長定制或選購激發/發射濾光片組合,如:

  • FITC類染料(激發485 nm / 發射 530 nm)

  • DAPI類染料(激發 360 nm / 發射 460 nm)

  • Cy5類染料(激發 620 nm / 發射 670 nm)

2. 環境控制支持

適用于酶反應、細胞反應等需恒溫條件實驗,溫控模塊支持持續加熱至45°C,且溫度穩定性良好。

3. 自動化兼容性

Fluoroskan 可接入Thermo Fisher自動化工作站平臺,實現自動進樣、數據處理、報表生成等流程整合,支持大批量樣本檢測流程。


七、維護簡要與服務支持

設備配有自校準與異常診斷機制,在光源、濾光片或讀取頭狀態異常時將自動提示。定期維護建議包括:

  • 每周檢查濾光片與光路清潔狀況

  • 每月查看激發/發射濾光片是否老化或污染

  • 每半年進行信號基線校準(由軟件引導操作)

售后支持方面,Thermo Fisher 提供標準質保、遠程診斷、技術培訓與應用指導服務,適用于實驗人員快速掌握儀器操作與故障排查技巧。


八、總結

Fluoroskan(5200450)以其緊湊結構、靈活波長組合、軟件集成度高等特點,為熒光類檢測提供了一種具備穩定性與適應性的實驗平臺。它適用于需要靈敏熒光信號檢測的分子生物學與細胞生物學應用,從基礎科研到方法開發均可使用。實驗人員可依據自身應用目標進行濾光片配置、程序設定及數據輸出方式的個性化調整,從而構建符合實驗場景的檢測流程。


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