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如何用生化培養箱做酚類廢水生物處理實驗
TCP是有機廢水中一種zui常見的氯酚類物質，主要來源于造紙、印染、紡織等行業廢水。由于TCP的水溶解性較大，且土壤等固體物質對其吸附和固定作用較弱，常以水為載體廣泛存在。TCP結構較為穩定，難以降解，且具有三致性，美國環?？偩忠褜⑵淞袨榱?ldquo;優先污染物”。利用真菌、青霉菌、曲霉菌和酵母菌等生物法處理酚類廢水，工藝簡單，效果好。
材料與方法
1.菌種與培養基
菌種：從膨潤土中分離得到的一種鐮刀菌，確定為層出鐮刀菌，屬于鐮刀菌屬。用生化培養箱的培養溫度為30℃。
固體培養基：KH2PO41.0g，MgSO4·7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，瓊脂15~20g，蒸餾水500mL。滅菌后加入相應濃度的TCP搖勻，在無菌操作臺上倒平板，待平板冷卻凝固后進行接種，zui后于30℃生化培養箱中倒置培養。
液體培養基：CaCl20.1g，KH2PO40.5g，NaCl0.2g，H2O1000mL，微量元素(FeSO4·7H2O3.82g，CoCl2·6H2O0.25g，H3BO36mg，CuSO4·5H2O2.9mg等)1mL。所有培養基均在121℃下滅菌30min。
孢子懸濁液：在馴化好且長有豐富的白色分生孢子的蛋白胨瓊脂培養基中刮取部分孢子置于無機鹽固體培養基(含100mg·L-1TCP)上，30℃恒溫培養。7d后轉接于150mg·L-1TCP的無機鹽固體培養基馴化3次，待菌體大量長出后于無菌條件下刮取孢子至無菌蒸餾水中，振蕩分散成乳白色的孢子懸液，光密度約為0.1(OD400)，孢子個數為3.1×106個·mL-1。
2.試劑與儀器
試劑：氨水，乙醇(純度>90%)，濃鹽酸，稀鹽酸，三氯酚(TCP)(化學純)，4-氨基安替比林，NaCl，緩沖溶液。
主要儀器：液相色譜儀，電子天平，紫外可見分光光度計，電熱恒溫鼓風干燥箱，生化培養箱，恒溫振蕩器，單人水平垂直兩用凈化工作臺，高壓蒸汽滅菌器，高速冷凍離心機。
3 .TCP的降解條件
取0.05g過濾出的菌體(濕重)的菌體孢子懸濁液(600nm處吸光度為0.16～0.165)，加入50mL液體培養基濃度一定的TCP溶液中，在一定溫度、pH、150r·min-1下繼續培養，每間隔24h測定TCP濃度，分別研究溫度、pH、外加碳源、氮源、氯離子及TCP初始濃度對其降解效率的影響。溫度影響實驗條件為pH7.0，TCP初始濃度為30mg·L-1，溫度25℃、30℃和35℃。pH影響實驗條件為30℃，TCP初始濃度為30mg·L-1，pH為2.0~8.0。外加碳源影響實驗條件為30℃、pH7.0，TCP初始濃度為30mg·L-1，葡萄糖(1g·L-1.3g·L-1.5g·L-1)。氮源影響實驗條件為30℃、pH7.0，TCP初始濃度為30mg·L-1，氮源物質為NH4Cl、NaNO2、蛋白胨、NH4NO3和NaNO3(濃度均為0.2g·L-1)。氯離子影響實驗條件為30℃、pH7.0，TCP初始濃度為30mg·L-1，NaCl濃度為0~0.6g·L-1。TCP濃度影響實驗條件為30℃、pH7.0，TCP初始濃度為10~50mg·L-1。平行試驗3次，取其平均值。