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上海喬芥生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第3年

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ELISA試劑盒檢測(cè)原理

時(shí)間:2024/5/15閱讀:797
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試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被活性氧抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品活性。

 實(shí)驗(yàn)原理
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELIAS)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等有點(diǎn)。

標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NAN3的樣品,因NAN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


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