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實驗室儀器

為確保GIBCO澳洲胎牛血清實驗的準(zhǔn)確性,脂肪酸的去除很關(guān)鍵

時間:2023/7/24閱讀:883
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   GIBCO澳洲胎牛血清是實驗室常用的天然培養(yǎng)基。它富含各種營養(yǎng),但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細(xì)胞培養(yǎng)帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質(zhì)檢中,也要進行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質(zhì)。而GIBCO胎牛血清的批號,則保證了每個批次的生產(chǎn)都是可以追溯的。
  在大部分試驗中是不需要對GIBCO澳洲胎牛血清中的脂肪酸進行去除的,但是在進行某些特殊細(xì)胞培養(yǎng)的時候為了保證實驗的準(zhǔn)確性和我們要讀胎牛血清中的某些成分進行去除,常見的脂肪酸去除,我們一般用一下方法。
  1、溶解:取適量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。 用濃度為0.2N的HCl,調(diào)節(jié)PH至3~3.5。
  2、解析:充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續(xù)攪拌,維持30min。
  3、吸附:加入5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水混合物中進行冰水浴,同時持續(xù)攪拌,維持1小時。過濾,濾渣回收后再利用。
  4、濃縮:濾液用0.2N的NaOH調(diào)節(jié)PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器進行超濾濃縮。
  5、凍干:將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40℃,持續(xù)1小時左右,升到-25℃,持續(xù)10~20小時,再緩慢升溫至0℃,維持1~4小時,升溫至保存溫度20℃,分裝為成品。

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