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培養(yǎng)基的配置
閱讀：1618 發(fā)布時(shí)間：2015-5-28
摘要: 培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源、碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水和生長(zhǎng)因素，但不同營(yíng)養(yǎng)類型、不同種類的...
培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源、碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水和生長(zhǎng)因素，但不同營(yíng)養(yǎng)類型、不同種類的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的要求又有很大差異。培養(yǎng)基還需具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。
以下為培養(yǎng)基的配置的常規(guī)方法，如配方中有特殊規(guī)定或要求，以配方為依據(jù)。
1. 根據(jù)配方，計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般可用電子天平稱量，遵循由含量低到含量高的稱量原則。針對(duì)含量少的成分，可按比例配成高濃度溶液，再按所需量用移液管吸取。將稱好的成分放入相應(yīng)玻璃容器中。
2. 加入所需量的水（建議使用純化水），加熱使其*溶解。液體培養(yǎng)基建議使用
3. 若配制固體培養(yǎng)基，則稱取1.2～2.0％的瓊脂放進(jìn)已稱量好的培養(yǎng)基中，繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解。加熱中隨時(shí)攪拌，防止溢出或糊底。燒糊的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)破壞，并產(chǎn)生有毒物質(zhì)，不宜再用。
4. 待培養(yǎng)基稍冷卻后，按配方要求調(diào)整pH值。用10％NaOH溶液（或10％HCl溶液）調(diào)整所配培養(yǎng)基的pH。加堿（或酸）溶液時(shí)，應(yīng)邊滴加邊攪拌，直至zui后調(diào)至要求的pH值。
5. 配好的培養(yǎng)基，根據(jù)需要趁熱分裝至試管或錐形瓶中。裝瓶量一般為瓶容量的1/3～1/2；裝試管一般為試管高度的1/5～1/4，以免滅菌時(shí)培養(yǎng)基上溢。
6. 用膠塞塞住管口或瓶口。膠塞既有利于通氣，又有濾菌作用，故松緊、大小應(yīng)適當(dāng)，以免使用時(shí)影響操作。
7. 應(yīng)按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時(shí)進(jìn)行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃、15min高壓濕熱滅菌法，以保證滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。
8. 滅菌后取出的固體培養(yǎng)基，根據(jù)需要可將試管立即斜放，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基，斜面長(zhǎng)度一般以不超過(guò)試管長(zhǎng)度的1/2為宜；半固體培養(yǎng)基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。錐形瓶中的培養(yǎng)基，冷卻到45～50℃，倒進(jìn)無(wú)菌培養(yǎng)皿中，冷凝后即制成平板培養(yǎng)基，可用于菌種的分離、鑒定等。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進(jìn)菌種。
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