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MitoTracker Deep Red FM

MCE 國際站：MitoTracker Deep Red FM

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號(hào)：HY-D1783

CAS：873315-86-7

純度：≥99.0%

存儲(chǔ)條件：-20°C，避光，氮?dú)獗４?*溶劑中：-80°C，6 個(gè)月；-20°C，1 個(gè)月（避光，氮?dú)獗４妫?/p>

運(yùn)輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：MitoTracker Deep Red FM 是一種紅色熒光染料，可以選擇性地積聚在線粒體基質(zhì)中。MitoTracker Deep Red FM 通過與半胱氨酸殘基的游離硫醇基反應(yīng)共價(jià)結(jié)合線粒體蛋白，從而可以不依賴膜電位即對(duì)線粒體膜電位進(jìn)行染色。激發(fā)/發(fā)射波長 644/665 nm。（儲(chǔ)存方式：避光保存。）

生物活性：MitoTracker 深紅色 FM 熒光染料，選擇性積累在線粒體基質(zhì)中。 MitoTracker Deep Red FM 通過與半胱氨酸殘基的游離硫醇反應(yīng)，共價(jià)結(jié)合線粒體蛋白，從而使線粒體膜電位的染色不受膜電位的影響。激發(fā)/發(fā)射波長 644/665 nm^[1]。儲(chǔ)存：避光。體外： 一般方案

1. MitoTracker Deep Red FM 工作準(zhǔn)備溶液
1.1 儲(chǔ)備液的制備
將50 μg MitoTracker Deep Red FM 溶解于74.4 μL DMSO 中，得到1 mM 儲(chǔ)備液。
注意：建議將儲(chǔ)備液保存在- 20℃和-80℃避光，避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.2 MitoTracker Deep Red FM工作液的制備
將原液用無血清細(xì)胞培養(yǎng)基或PBS稀釋液稀釋1:5000或1:50000，得到20-200 nM的工作液。
注意：請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整MitoTracker Deep Red FM工作液的濃度。
2.細(xì)胞染色< br/> 2.1 懸浮細(xì)胞（6孔板）
4°C 1000 g 離心 3-5 分鐘，然后棄去上清液。 PBS洗兩次，每次5分鐘。細(xì)胞密度為1×10⁶/mL。
b．加入1 mL工作液，室溫孵育15-45分鐘。
c． 4°C 400 g 離心 3-4 分鐘，然后棄去上清液。
d． PBS洗兩次，每次5分鐘。
e．用無血清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞。熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)觀察。
2.2貼壁細(xì)胞
a．在無菌蓋玻片上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。
b．從培養(yǎng)基中取出蓋玻片并吸出多余的培養(yǎng)基。
c．加入100 μL工作液，輕輕搖勻，使細(xì)胞完-全覆蓋，室溫孵育5-30分鐘。
d．用中液清洗兩次，每次 5 分鐘。通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)觀察。

儲(chǔ)存
-20°C，1年。避光

注意事項(xiàng)
1、請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整MitoTracker Deep Red FM工作液的濃度。
2、本產(chǎn)品僅供研發(fā)使用，不得用于藥品、家庭或其他用途。
3、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服和一次性手套進(jìn)行操作。

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參考文獻(xiàn)：

[1]. Buckman JF, et al. MitoTracker labeling in primary neuronal and astrocytic cultures: influence of mitochondrial membrane potential and oxidants. J Neurosci Methods. 2001 Jan 15;104(2):165-76.