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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 食品/農產品,農林牧漁 |
|---|
產品介紹
一、己烯雌酚檢測試劑盒概要
己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）是甾類同化激素，被大量用于促進反芻動物的生長。但由于己烯雌酚存在明顯的致癌性，歐美等發達國家已相繼禁止或嚴格禁止使用。我國農業部第235號文件中規定，動物源性食品中己烯雌酚的殘留xian量為不得檢出。
二、己烯雌酚檢測試劑盒原理
己烯雌酚試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的己烯雌酚，試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的己烯雌酚和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗己烯雌酚抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含己烯雌酚含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中己烯雌酚的殘留量。
三、適用范圍
己烯雌酚試劑盒可定性、定量檢測動物組織（肌肉、肝臟等）、尿液、飼料等樣品中己烯雌酚的殘留量。
四、 技術指標
1 試劑盒靈敏度：0.1ppb(ng/ml)
2 反應模式：37℃，30min～30min～15min。
3 檢測下限：
組織（蝦、魚）：0.2ppb
豬肉/肝、雞肉/肝：2ppb
飼料：……20ppb
尿液：……0.6ppb
4 交叉反應率：
己烯雌酚：100%
雙烯雌酚：38.5%
己烷雌酚：8.5%
己炔雌二醇：<0.1%
雌三醇：…<0.1%
5 樣本回收率：
尿 樣 ： 70%±10%
組 織 ： 85%±10%
飼 料 ： 90%±10%
五試劑盒組成
酶標板、標準品、高標準品、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液
六、貯藏條件及保存期
儲藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。
保 質 期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。
酶聯免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
1 編 號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應：加標準品應用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光反應30分鐘。
3 洗 滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干（用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
4 加酶反應：加酶標記物100µl/孔，25℃避光反應30分鐘。
5 洗 滌：同上
6 顯 色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。
7 終 止：加終止液50µl/孔，輕輕振蕩混勻，終止反應。
8 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
結果分析
1 百分吸光率的計算
標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第一個標準液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即
百分吸光度值（%）＝A×100%
A0
A—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標準溶液的平均吸光度值
2 標準曲線的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標，對應的標準液濃度（ppb）的對數為橫坐標，繪制標準液的半對數曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實際濃度。
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