Edman降解測序：一種可靠的N端蛋白分析方法檢測技術服務詳情介紹

引言：jīngzhǔn識別N端序列，為蛋白研究打下基礎

在dànbáizhì研究中，氨基酸序列的jīngquè鑒定是理解其功能與結構的dìyī步。雖然現代質譜技術已在dànbáizhì組學領域大放異彩，但在某些特定場景下，一種經典的序列分析方法依然bùkěhuòquē——Edman降解（Edman degradation）。這種以化學方式從N-端逐步解析dànbáizhì序列的技術，因其高特異性和準確度，至今仍廣泛應用于蛋白表達驗證、N端修飾檢測、質量控制等多個關鍵領域。作為dànbáizhì測序服務的重要組成部分，Edman降解為科研人員提供了一種低偏差、高保真度的Nduāncèxù手段。在百泰派克生物科技，我們結合自動化Edman測序平臺與高質量純化流程，為客戶提供jīngzhǔn可靠的N端序列解析解決方案，助力基礎研究與生物制藥開發。

一、什么是Edman降解？

Edman降解是一種基于化學反應的順序性Nduāncèxù方法，由Pehr Edman于1950年提出。其核心原理在于使用苯異硫氰酸（PITC）與dànbáizhìN端的游離氨基反應，形成一種可切割的衍生物，隨后經酸水解釋放出dìyī個氨基酸殘基并進行鑒定。此過程可在保留剩余肽鏈完整性的前提下循環進行，從而一步步解碼dànbáizhì的N端序列。

Edman反應的三步核心流程：

1、PITC標記：在堿性條件下，PITC與肽鏈N端氨基結合，形成苯異硫氰酸酰胺。

2、酸解釋放：加入無水酸催化斷裂，使N端氨基酸以可識別的形式（PTH-AA）釋放。

3、序列循環：殘余肽鏈再次進入下一輪循環，重復上述步驟。

目前，市面上已發展出多種自動化Edman測序儀，使得該技術可對純化蛋白樣本進行高達30個氨基酸殘基的順序解析，具有良好的重復性與穩定性。

二、Edman降解的優勢與局限性

盡管質譜技術的興起為dànbáizhì組學打開了新天地，但Edman降解依然以其化學反應的確定性和序列位點的準確性在多個關鍵場景下保有一席之地。

1、優勢：

（1）高度特異性：僅對N端游離氨基起反應，避免其他位點干擾。

（2）序列位置確定：每次循環均從N端開始，序列定位準確。

（3）適用于蛋白表達驗證：可與理論序列比對，確認表達產物正確性。

（4）檢測翻譯后修飾：能直接判斷N端是否有乙酰化、甲?；确忾]修飾。

2、局限性：

（1）樣本要求高：必須為純化蛋白，N端不能被封閉或修飾。

（2）測序長度有限：一般zuì多測定20~30個氨基酸。

（3）通量較低：不適用于復雜混合物或高通量分析。

因此，在實驗設計階段，研究人員需權衡不同測序技術的適用性，以獲得zuì具信息價值的數據。

三、Edman測序在現代dànbáizhì研究中的應用

1、生物藥開發與質量控制

在重組蛋白藥物的生產中，N端序列是藥品一致性、穩定性和正確表達的重要指標。Edman測序可用于：

* 驗證表達產物的N端氨基酸與設計序列是否一致

• 檢測信號肽是否成功切除

• 監控不同批次之間的表達一致性

2、翻譯起始位點驗證

在構建表達載體時，研究人員往往關心是否從預期的起始密碼子開始翻譯。Edman降解通過直接讀取N端序列，可jīngzhǔn驗證翻譯起始位點是否偏移。

3、蛋白N端修飾分析

某些蛋白可能經歷N端乙?；?、甲?；芳柞；刃揎棥．擡dman降解無法進行時，反而說明存在封閉修飾，提示需進一步使用質譜進行結構確認，從而構建完整的N端修飾圖譜。

四、Edman測序與質譜：互補而非替代

在現代dànbáizhì組學中，Edman測序與質譜并非競爭關系，而是優勢互補。質譜具有高通量、廣覆蓋的優勢，可快速掃描復雜樣本；而Edman降解則以其jīngzhǔn、低背景、序列位置明確的特點，為重點蛋白提供jīngzhǔn確認。

常見的組合策略包括：

1、先質譜、后Edman：初篩蛋白后，對關鍵條帶進行Edman驗證

2、Edman篩選修飾蛋白，再上LC-MS/MS定位修飾位點

3、抗體驗證中同時使用質譜和Edman，確保N端一致性

百泰派克生物科技的Nduāncèxù服務優勢

在百泰派克生物科技，我們深知Nduāncèxù在科研和生物制藥開發中的重要性。為此，我們搭建了自動化Edman測序平臺，配套完善的純化、定量和質量控制體系，為客戶提供一站式N端序列分析服務。

我們的優勢包括：

• 高靈敏度設備：搭載優良PPSQ-51A測序儀，zuì少可識別1~5 pmol蛋白樣本

• 純化支持服務：提供SDS-PAGE條帶回收、PVDF膜轉印等前處理方案

• 多輪循環控制：zuì長可達30個氨基酸殘基，準確還原N端結構

• 詳盡報告交付：包括原始圖譜、電泳圖片、序列比對和技術說明

在如今強調“jīngzhǔn測序、全鏈驗證"的時代背景下，Edman降解并未被淘汰，反而在多種新型生物制品開發中再次“回歸主場"。Edman降解測序依然憑借其化學解析的確定性和N端分析的特異性，在dànbáizhì研究領域保持dútè價值。它不僅是質譜技術的重要補充，更在某些關鍵應用場景中發揮著bùkětìdài的作用。百泰派克生物科技提供zhuānyè的基于Edman降解的蛋白N端序列分析服務，可解決您的項目問題，加速您的研究項目，為您帶來優質的服務體驗。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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