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小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測(cè)試劑盒
  • 小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間:2024-12-08 21:00:07

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小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測(cè)試劑盒僅供科學(xué)研究使用,可以被用來(lái)定量檢測(cè)細(xì)胞液中的細(xì)胞液、體液。組織液中血清以及血漿等液體標(biāo)本樣品中關(guān)于小鼠某一些成分的含量的檢測(cè)試劑。

上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有zhuan門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、山羊、牛、豬、犬、雞、馬、猴、魚(yú))、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒。

小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理方法:

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

關(guān)于血清樣本注意事項(xiàng):

大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP未標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。

血清的采集、處理以及保存如下:

①    真空采集新鮮血液,加入無(wú)菌試管中;

②    采血后室溫靜置1小時(shí);

③    將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10分鐘

④    取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)存于2-8℃;1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)存于-20℃;長(zhǎng)期檢測(cè)可存于-80℃,可放置保存6個(gè)月)

備注:

1.      (96T/48T)打開(kāi)包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全。

2.      標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:0、10、20、40、80、160 pg/mL

3. 樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:

1.      請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

2.      從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A、B50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。



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