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檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被（GAD）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的（GAD）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品活性。

大鼠(GAD)酶活性測定試劑盒 ELISA法組成：（標準品濃度依次為：0、3、6、12、24、48 U/L）

操作時注意事項：

1） 收到大鼠(GAD)酶活性測定試劑盒 ELISA法后，為保證檢測效果，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲存。除非特別注明，試劑盒大多再2~8℃條件下儲存。

2） 在實驗進行前，請確認包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進行后續(xù)操作。

3） 溶解標準品過程中，注意標準品是否受潮，過程中要避免產生泡沫。

4） 為了避免交叉污染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需呀更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。

5） 每次孵育時，正確使用封板膠條紙可保證結果的準確性。

6） 正確洗板有助于實驗結果的穩(wěn)定性。

7） TMB顯色底物在上板前應為無色，請避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍色。

8） 終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請充分混勻。