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人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性
  • 人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性
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貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-05-24 21:00:08

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上海軒澤康生物人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性采用一步間接法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性在國內眾多實驗室被廣泛使用,深受廣大科研者的好評。上海軒澤康生物專ye供應酶聯免疫分析試劑盒,部分現貨供應產品有人、大鼠、小鼠、兔、豬、犬、雞、猴、植物等ELISA試劑盒。所有elisa試劑盒均提供免費代測,實驗全程提供技術指導。歡迎咨詢、訂購!

一.   檢測原理:試劑盒采用一步間接法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中人抗蛋白C抗體(aPC)的存在與否。

二. 96T試劑盒組成及其配置:

①微孔酶標板( 12 孔×8 條);

②陰性對照 0.5mL;

③陽性對照 0.5mL;

④檢測抗原-HRP 10mL;

⑤20×洗滌緩沖液 25mL;

⑥稀釋液 6mL;

⑦底物 A 6mL;

⑧底物 B 6mL;

⑨終止液 6mL;

⑩封板膜 2 張;說明書 1 份;自封袋 1 個.

備注:20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

三. 人抗蛋白C抗體(aPC)ELISA檢測試劑盒 定性操作步驟:

①從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

②設置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各 50μL;

③待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加稀釋液 40μL;

④隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

⑤棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。

⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

⑦每孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的OD 值。

四. 實驗結果判斷:

①試驗有效性:陽性對照孔 OD 值平均值≥1.00; 陰性對照孔 OD 值平均值≤0.15。

② 臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

③陰性判斷:樣品 OD 值<臨界值(Cut off),樣品為陰性

④陽性判斷:樣品 OD 值>臨界值(Cut off),樣品為陽性

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