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植物活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒使用注意事項：1. 本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用，溶液應輕輕搖勻后使用。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，這屬于正常現象，加熱使結晶溶解后再配制。2. 底物液使用前建議先行檢查，若溶液顏色發藍則已失效，棄去。3. 以上標準孔及待查樣品均建議做復孔，每次測定應同時制作標準曲線。4. 板條開封后剩余板條要密封好，保持板條干燥。5. 不同批號的試劑盒組分不能混用。6.正確拿酶標板：不要接觸板的底部，否則會影響度數。

植物活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒操作步驟：

【標準品的加樣】：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。
【加樣】：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
【加酶】：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
【測定】：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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